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文檔簡介
1、目的:(1)觀察厭食癥幼鼠外周循環(huán)血中Ghrelin和Obestatin濃度的變化對體重和進食量的影響,探討中藥復(fù)方健兒散對厭食癥幼鼠外周循環(huán)血中Ghrelin和Obestatin濃度的影響。
(2)觀察厭食癥幼鼠胃底粘膜組織合成Ghrelin和Obestatin的變化;探討中藥復(fù)方健兒散對厭食癥幼鼠胃底粘膜組織合成Ghrelin和Obestatin的影響。
方法:選用無特定病原體(specificpatho
2、genfreeanimal,SPF)級Sprague-Dawley(SD)大鼠幼鼠80只,日齡35~40天,體重(65±5g),雌雄各半,隨機分為2周模型對照組(A1)、2周正常對照組(B1)、2周健胃消食片對照組(C1)、2周健兒散干預(yù)組(D1)、4周模型對照組(A2)、4周正常對照組(B2)、4周健胃消食片對照組(C2)及4周健兒散干預(yù)組(D2),每組10只,雌雄各半。除B1和B2采用正常飲食喂養(yǎng)外,其他六組模擬小兒厭食癥的主要病因
3、,采用汪受傳病因模擬法(南京中醫(yī)藥大學(xué)特制飼料喂養(yǎng)法)制備的特制飼料喂養(yǎng)大鼠,制作幼齡厭食大鼠模型。所有大鼠均單獨喂養(yǎng),自由進水、進食。共飼養(yǎng)六周。每日記錄大鼠進食量和體重,造模幼鼠攝食量平均下降20%~30%,或體重低于正常對照組10%~15%,但無腹瀉、拱背、蜷臥等顯著脾虛癥狀為造模成功標(biāo)志。C1和C2以健胃消食片灌胃,分別灌2周和4周;D1和D2以中藥復(fù)方健兒散灌胃,灌胃時間為2周和4周;其余各組以生理鹽水灌胃。記錄各組大鼠攝食量
4、及體重的變化;實驗結(jié)束后,從大鼠下腔靜脈中采血用雙抗體夾心ABC-ELISA法檢測各組大鼠血漿中Ghrelin和Obestatin的濃度;取出胃底組織采用免疫組化法檢測各組大鼠胃底組織中Ghrelin和Obestatin的表達;采用RT-PCR法檢測各組大鼠胃底組織合成GhrelinmRNA的量。
結(jié)果:
(1)藥物干預(yù)兩周后,與正常組相比,健兒散干預(yù)組中的幼鼠厭食癥狀逐漸改善,即進食量增加(P<0.05),
5、體重增加(P<0.05);藥物干預(yù)四周后,與正常組相比,健兒散干預(yù)組中的幼鼠厭食癥狀已經(jīng)消失,進食量大于正常組(P<0.05),體重如正常大鼠。
(2)藥物干預(yù)兩周后,健兒散干預(yù)組循環(huán)血液中的Ghrelin水平較之正常組顯著升高(P<0.01);健兒散干預(yù)組循環(huán)血液中的Obestatin水平較正常組有顯著性差異(P<0.05);藥物干預(yù)四周后,健兒散干預(yù)組循環(huán)血液中的Ghrelin和Obestatin水平較之正常組顯著升高
6、(P<0.01)。
(3)藥物干預(yù)兩周后,健兒散干預(yù)組中大鼠胃底粘膜組織中Ghrelin和Obestatin陽性表達的結(jié)果與正常組相比較P<0.01。藥物干預(yù)四周后,健兒散干預(yù)組中大鼠胃底粘膜組織中Ghrelin陽性表達的結(jié)果與正常組的表達結(jié)果相比較P<0.01;健兒散干預(yù)組中大鼠胃底粘膜組織中Obestatin陽性表達的結(jié)果與正常組的陽性表達相比較,沒有統(tǒng)計學(xué)差異。
(4)藥物干預(yù)兩周后,健兒散干預(yù)組中大鼠
7、胃底粘膜組織合成的GhrelinmRNA量與正常組中大鼠胃底粘膜組織合成的GhrelinmRNA量相比較P<O.O1。藥物干預(yù)四周后,健兒散干預(yù)組中大鼠胃底粘膜組織合成的GhrelinmRNA量與正常組相比較P<O.O1。
結(jié)論:
(1)中藥復(fù)方健兒散明顯改善厭食癥幼鼠的癥狀,并且與時間呈正相關(guān);
(2)中藥復(fù)方健兒散改善厭食癥幼鼠癥狀的機制是,健兒散能夠使外周循環(huán)血液中Ghrelin和Obes
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