黃檗組織培養(yǎng)及其生物堿含量研究.pdf

1、本研究以黃檗(Phellodendron amurense rupr.)的新梢莖尖、葉片、葉柄及幼胚培養(yǎng)獲得的組培苗的下胚軸等為外植體，通過正交設(shè)計(jì)、完全組合設(shè)計(jì)，研究植株誘導(dǎo)愈傷組織、繼代增殖、生根培養(yǎng)等再生技術(shù)體系，篩選出適合不同外植體培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方，結(jié)果表明:
　　 1)莖尖誘導(dǎo)長成無根苗最佳的培養(yǎng)基為:MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.5 mg/L，出苗率為79.68％。新梢葉片愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為:

2、MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5mg/L，愈傷組織形成率為77.56％;誘導(dǎo)愈傷組織再分化的最佳培養(yǎng)基為:MS+6-BA1.0mg/L+ NAA0.5 mg/L。新梢葉柄愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為:MS+6-BA1.0mg/L+NAA1.0 mg/L，愈傷組織的形成率為71.49％。
　　 2)黃檗幼胚誘導(dǎo)萌發(fā)的最佳培養(yǎng)基為:1/2MS+6-BA0.5 mg/L+2.4-D0.4mg/L+NAA1.0 mg/L+TD

3、Z0.2 mg/L，最高成苗率72.76％;誘導(dǎo)成為愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為:MS+6-BA1.0 mg/L+2.4-D0.4 mg/L+NAA1.0 mg/L+TDZ0.1 mg/L，最高誘導(dǎo)率為49.89％。
　　 3)由胚培養(yǎng)獲得的試管苗胚軸為材料誘導(dǎo)愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為:MS+6-BA0.5 mg/L+2.4-D0.2 mg/L+NAA1.5 mg/L+IBA0.4 mg/L，誘導(dǎo)率達(dá)70.21％;繼代增殖的最佳培養(yǎng)基為

4、:MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L。由胚萌發(fā)獲得的試管苗葉片為材料誘導(dǎo)愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為:MS+6-BA1.0 mg/L+KT0.3mg/L+NAA1.0 mg/L+2.4-D0.4 mg/L，誘導(dǎo)率達(dá)100％;繼代增殖的最佳培養(yǎng)基為:MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L。
　　 4)由外植體獲得的無根苗的最佳生根培養(yǎng)基為:1/2MS+IBA0.2 mg/L+NAA0.1mg/L，平均

5、生根率為94.51％;由胚培養(yǎng)獲得的無根苗的最佳培養(yǎng)基為:1/2MS+IBA0.2mg/L+NAA0.05 mg/L，平均生根率最高為65.48％。
　　 5)生根后的試管苗的成活率達(dá)86％。經(jīng)測(cè)定，黃檗韌皮中的小檗堿含量最高，達(dá)0.6％，愈傷組織中的含量為0.45％，成年葉片中的含量為0.21％，組培全株苗的含量為0.14％;愈傷組織中小檗堿含量相對(duì)較高。掌葉防己堿各測(cè)量樣品中的含量樹皮(0.33％)＞樹葉(0.10％)＞愈傷