粉葛組織培養(yǎng)及其銅、鉛、鎘含量研究.pdf

1、粉葛為豆科植物甘葛藤(Pueraria thomsonii Benth.)的干燥根。性味甘、辛、涼，具有解肌退熱，生津止渴，透疹，升陽止瀉，通經(jīng)活絡(luò)，解酒毒等功效。粉葛是我國傳統(tǒng)的一味中草藥，可藥食兩用。近年來，粉葛的藥用和食用價值越來越受到人們的關(guān)注，尤其是在保健品的開發(fā)上。所以，粉葛具有廣闊的開發(fā)價值和市場前景。
　　 本課題利用采自大竹縣的秦巴2號粉葛的腋芽及莖尖作為外植體，消毒后，接種于啟動培養(yǎng)基上培養(yǎng)。實驗結(jié)果表明：最

2、佳啟動培養(yǎng)基為：MS+6-BA2.0mg/L+IAA0.2mg/L；叢生芽增殖最佳培養(yǎng)基：MS+6-BA0.5mg/L+KT0.1mg/L+IAA0.05mg/L；采用先暗培養(yǎng)再光培養(yǎng)的方式有利于粉葛愈傷組織的誘導(dǎo)(每天光照12h，光強度12001x，培養(yǎng)溫度維持在25±1℃)，莖段是愈傷組織誘導(dǎo)的最佳外植體，愈傷組織誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基：MS+6-BA1.0mg/L+IAA0.2mg/L；生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基：1/2MS+IAA1.0mg/

3、L；選取生長健壯的試管苗，煉苗2d后移栽到苗床(營養(yǎng)土：蛭石：珍珠鹽=3:1:1)中，成活率大于95％。該方法可快速建立起粉葛的無菌快繁體系。
　　 本課題利用粉葛試管苗的嫩芽作為包埋材料對人工種子進行研究。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)：3％海藻酸鈉在2％氯化鈣中反應(yīng)8～10min是粉葛人工種子的最佳制作條件；人工胚乳為MS1/2+IAA0.5mg/L+蔗糖30g/L的粉葛人工種子直接播種在MS1/2培養(yǎng)基上，人工種子的發(fā)芽率和生根率均為100

4、％；采用培養(yǎng)皿培養(yǎng)的效果不如培養(yǎng)基。
　　 本課題利用火焰原子吸收光譜法測定粉葛中銅的含量，石墨爐原子吸收光譜法測定粉葛中鉛、鎘的含量。在實驗條件優(yōu)化情況下，測定方法銅、鉛、鎘的檢出限分別為：0.03mg/L、0.243μg/L和0.012μg/L，加標回收率在97.26％-105.60％之間，相對標準偏差均小于5％。方法學(xué)考察符合分析要求，所測7種不同產(chǎn)地粉葛樣品中銅、鉛、鎘三種重金屬元素含量均在《藥用植物及制劑進出口綠色行業(yè)