活化的凝血因子X(FXa)和凝血酶(Thrombin)的他離制備以及相關(guān)物性質(zhì)的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究利用離心、離子交換色譜等現(xiàn)代分離手段和分析方法,從牛血采集開始,利用離心技術(shù)分離得到血漿;根據(jù)鋇鹽吸附維生素K依賴的凝血因子的性質(zhì).研究了硫酸鋇和檸檬酸鋇兩種鋇鹽鹽沉淀吸附蛋白的效果,檸檬酸鋇沉淀吸附效果較好;改進(jìn)了檸檬酸鋇沉淀上的蛋白洗脫方法,直接將檸檬酸鋇沉淀加入到30??投攘蛩犸芤航諧戀磣輝倮昧蛩犸С戀淼鞍追旨都際醯玫僥蜃覺(FX)和凝血酶原等蛋白粗提物;采用離子交換層析技術(shù)(P-Sepharose柱、Mono

2、 Q柱、Resource S柱)成功分離得到了FX和凝血酶原組分,并成功地活化和純化了FXa凝血酶,獲得了電泳純的產(chǎn)品,并且解決了與該項(xiàng)分離、活化和純化路線相關(guān)的所有技術(shù)難點(diǎn),建立了一種高效分離工藝路線.凝血因子X被RVV-X活化可以通過兩條路徑:(1)FX→FX<,β>→FX<,aβ>;(2)FX→FX<,aα>→FX<,aβ>.該研究以RVV-X作活化酶,通過電泳方法對FX的活化進(jìn)行了觀察,結(jié)果證明中間態(tài)的FXa<,α>比中間態(tài)的F

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