三聚氰胺對養(yǎng)殖水體中羅非魚幾種酶活性影響的研究.pdf

1、三聚氰胺在工業(yè)生產中應用廣泛，它可通過多種途徑進入水環(huán)境包括養(yǎng)殖水體。此外，三聚氰胺被人為添加到飼料中以提高其蛋白質表觀含量。因此，有必要研究水和飼料中的三聚氰胺對魚類健康的影響，并探尋監(jiān)測三聚氰胺污染的生物標志物。
　　有毒有害物質在生物體內的代謝途徑主要有解毒途徑和氧化還原循環(huán)途徑，涉及到重要的代謝酶如7—乙氧基—3—異吩噁唑酮—脫乙基酶(EROD)和谷胱甘肽硫轉移酶(GST)、抗氧化酶如超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶(

2、CAT)。
　　本文以我國重要經濟魚類——羅非魚作為研究對象，采用室內模擬水生態(tài)系統(tǒng)，研究了三聚氰胺對羅非魚體內上述幾種酶的影響。主要研究內容和結果如下:
　　1.水體暴露方式下三聚氰胺對羅非魚肝臟和腎臟中EROD、GST、SOD、CAT活性的影響。模擬養(yǎng)殖水體中，三聚氰胺的濃度為0.05 g·L-1。試驗結果表明，與對照組相比，羅非魚肝臟和腎臟中代謝酶和抗氧化酶的活性在第1d均被誘導，且隨著暴露時間的延長均呈現(xiàn)一定的變化規(guī)

3、律?？傮w上看，羅非魚肝臟和腎臟中EROD酶、GST酶、SOD酶和肝臟中CAT酶的活性都呈現(xiàn)出現(xiàn)誘導-抑制-誘導的趨勢。但隨著時間的繼續(xù)延長，最后都再次被抑制。羅非魚腎臟中CAT活性則呈現(xiàn)誘導-抑制的趨勢。所以，EROD酶、GST酶、CAT酶和SOD酶活性可在一定程度上作為養(yǎng)殖水體中三聚氰胺污染的生物監(jiān)測指標。
　　2.飼料暴露方式下三聚氰胺對羅非魚肝臟和腎臟中EROD、GST、SOD、CAT活性的影響。試驗中，先用含三聚氰胺的飼料

4、(10g/kg)喂養(yǎng)10d，然后再投喂不含三聚氰胺的基礎飼料10d。結果表明，在飼料暴露的10d中，羅非魚肝臟EROD、GST、CAT和SOD的活性都呈現(xiàn)出現(xiàn)誘導-抑制的趨勢，暴露結束后的10d，肝臟中四種酶的活性最終都恢復到暴露初期的水平，與對照組無顯著差異。腎臟中EROD、GST、CAT也呈現(xiàn)出現(xiàn)誘導-抑制的趨勢，但SOD活性卻持續(xù)抑制，至暴露結束后活性有所上升。雖然在停止暴露第10d（飼養(yǎng)第20d）時仍被抑制，但與對照組無顯著差異

5、。飼料中的三聚氰胺引起的羅非魚肝臟和腎臟中EROD、GST、SOD和CAT酶活性的顯著性變化以及酶活性的時間-效應關系，表明三聚氰胺可擾亂羅非魚肝臟和腎臟酶系的正常功能。另一方面，也在某種程度上說明了EROD、GST、SOD和CAT酶的活性可作為飼料中三聚氰胺污染的生物監(jiān)測指標。
　　3.不同水體暴露濃度下三聚氰胺對羅非魚肝臟和腎臟酶活性影響的時間-效應和劑量-效應關系。結果表明，在前8d，三聚氰胺在羅非魚肝臟和腎臟中的含量隨暴露

6、時間延長而增加。此后逐漸下降，至暴露結束時恢復到暴露初期的水平。
　　在第15d取樣分析，在0.01～0.05 g·L-1濃度范圍內，三聚氰胺對羅非魚肝臟EROD活性呈現(xiàn)誘導作用，且誘導作用隨暴露濃度的增加而增強;在三聚氰胺濃度為0.1 g·L-1時，肝臟EROD的活性出現(xiàn)驟然下降，與對照組相比，差異顯著(P＜0.05）。以腎臟EROD活性的上升率為縱坐標，三聚氰胺濃度的常用對數(shù)為橫坐標，在0.02～0.1 g·L-1范圍內進行回

7、歸分析，得方程:y=0.1282ln(x)+0.424。相關系數(shù)r=0.9999，表明腎臟中EROD的活性與該范圍內三聚氰胺濃度之間有極顯著的劑量-效應關系。
　　在0.01～0.05 g·L-1濃度范圍內，三聚氰胺對羅非魚肝臟GST活性呈現(xiàn)誘導作用，在0.05 g·L-1時誘導率高達59.31％。在0.1 g·L-1時，肝臟GST的活性出現(xiàn)驟然下降現(xiàn)象，與對照組相比，無顯著性差異。在上述濃度范圍內，三聚氰胺對羅非魚腎臟GST活性

8、均產生了抑制作用。以腎臟GST活性的抑制率為縱坐標，三聚氰胺的濃度的常用對數(shù)為橫坐標，在0.02～0.1 g·L-1濃度范圍內進行回歸分析，得方程:y=0.1126ln(x)+0.7566。相關系數(shù)R=0.9999，表明腎臟中GST的活性與該濃度范圍內三聚氰胺濃度之間有極顯著的劑量-效應關系。
　　在0.01～0.1 g·L-1濃度范圍內三聚氰胺對羅非魚肝臟CAT的活性均產生了抑制作用。以肝臟CAT活性的抑制率為縱坐標，三聚氰胺濃

9、度的常用對數(shù)為橫坐標，在0.02～0.1 g·L-1濃度范圍內進行回歸分析，得方程:y=0.108ln(x)+0.4613。相關系數(shù)R=0.9998，表明肝臟中CAT的活性與該范圍內三聚氰胺濃度之間有極顯著的劑量-效應關系。而在(0.01～0.1 g·L-1)濃度范圍內對羅非魚腎臟則是呈現(xiàn)抑制-誘導-抑制-誘導的變化趨勢，與對照組相比，差異均極顯著(P＜0.01)。
　　在0.01～0.1 g·L-1濃度范圍內，羅非魚肝臟SOD的

10、活性呈現(xiàn)抑制-誘導-抑制-誘導的趨勢，在0.02 g·L-1濃度下誘導作用最強，誘導率高達43.09％，與對照組相比，差異極顯著(P＜0.01)。在該濃度范圍內三聚氰胺對羅非魚的腎臟SOD活性均產生了誘導作用，在0.1 g·L-1時誘導作用最強，誘導率為40.87％，與對照組相比，差異顯著(P＜0.05)。羅非魚肝臟和腎臟SOD活性與三聚氰胺濃度間均無顯著的劑量-效應關系。
　　以上結果說明，在三聚氰胺脅迫下，羅非魚肝臟和腎臟中E