三聚氰胺在羅非魚(yú)中的殘留及消除規(guī)律研究.pdf

1、本文建立了水產(chǎn)飼料和水產(chǎn)品中三聚氰胺的檢測(cè)方法,對(duì)廣東省湛江市各大水產(chǎn)品市場(chǎng)的對(duì)蝦和羅非魚(yú)及幾家飼料生產(chǎn)企業(yè)的飼料進(jìn)行本底含量的調(diào)查檢測(cè),研究了三聚氰胺在羅非魚(yú)中的殘留及消除規(guī)律。研究結(jié)果如下:
　　 1.對(duì)水產(chǎn)飼料中三聚氰胺的高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)方法進(jìn)行了優(yōu)化。
　　 根據(jù)三聚氰胺的吸收光譜、化學(xué)結(jié)構(gòu)等理化性質(zhì),對(duì)流動(dòng)相組成比例、流速、pH等因素進(jìn)行了優(yōu)化,建立了三聚氰胺高效液相色譜檢測(cè)方法:DIKMAC18(

2、250mm×4.6mm,5μm)；流動(dòng)相為乙腈:離子對(duì)試劑溶液=8:92(v/v)；流速為1.2mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng):236nm；柱溫:40℃；出峰時(shí)間為15.58min。
　　 飼料樣品前處理:樣品經(jīng)酸性乙腈-水超聲提取,二氯甲烷反萃取后,上清液用固相萃取小柱凈化,用高效液相色譜儀測(cè)定,外標(biāo)法定量。結(jié)果:三聚氰胺在0.2～10 mg/L濃度范圍內(nèi)呈線(xiàn)性相關(guān),相關(guān)系數(shù)R2=0.9995。加標(biāo)水平在1.0～10mg/kg時(shí),回收

3、率為85.5％～93.6％,測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1％～2％,最低檢出限為0.2 mg/kg。
　　 2.建立了水產(chǎn)品中三聚氰胺的高效液相色譜(HPLC)快速檢測(cè)方法
　　 根據(jù)水產(chǎn)品原料基質(zhì)的特點(diǎn),對(duì)水產(chǎn)品的樣品前處理過(guò)程進(jìn)行優(yōu)化。
　　 水產(chǎn)品樣品前處理:以羅非魚(yú)和南美白對(duì)蝦為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,樣品采用50％甲醇水+1％三氯乙酸(3+1)震蕩提取,于5000r/min的離心機(jī)上離心10min,取上清液2mL轉(zhuǎn)移至2mL

4、離心管中,于8000r/min的高速離心機(jī)離心8min。取上清液過(guò)0.2μm濾膜上機(jī)測(cè)定。結(jié)果:本方法省去了固相萃取柱凈化的步驟,三聚氰胺在0.2～10.0ug/mL濃度范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)0.9989,加標(biāo)水平在0.5～10mg/kg范圍內(nèi),回收率為85％～91％,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差1％～2％,方法的檢出限為0.5mg/kg。
　　 3.采用所建立的水產(chǎn)飼料及水產(chǎn)品中三聚氰胺的檢測(cè)方法,對(duì)湛江市各大水產(chǎn)品市場(chǎng)的對(duì)蝦和羅非魚(yú)及

5、幾家飼料生產(chǎn)企業(yè)的飼料進(jìn)行本底含量的調(diào)查檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果顯示:在已檢測(cè)的樣品中,水產(chǎn)品中未檢出三聚氰胺,配合飼料中檢出率為4.3％,飼料原料中檢出率為4.5％。高蛋白飼料生產(chǎn)加工過(guò)程中存在人為添加三聚氰胺的可能,水產(chǎn)品中三聚氰胺本底值在允許范圍內(nèi)。
　　 4.模擬羅非魚(yú)養(yǎng)殖過(guò)程,對(duì)三聚氰胺在羅非魚(yú)肌肉和內(nèi)臟中的殘留消除規(guī)律進(jìn)行了研究。試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì),300尾體重為10～12g的羅非魚(yú)隨機(jī)分5組,每組60尾。各組分別飼喂添加

6、0mg/kg,1000mg/kg(0.1％),5000mg/kg(0.5％),10000mg/kg(1％),50000mg/kg(5％)三聚氰胺的飼料。試驗(yàn)期為50天,每隔5天各組隨機(jī)抽取3尾后稱(chēng)重,并采集肌肉和內(nèi)臟,分別測(cè)定其中的三聚氰胺殘留量。在第10次采樣結(jié)束后,對(duì)各組羅非魚(yú)均改投空白飼料,試驗(yàn)期為10天,各組每天隨機(jī)抽取3尾后稱(chēng)重,并采集肌肉和內(nèi)臟,分別測(cè)定其中的三聚氰胺殘留量。結(jié)果表明:(1)飼料中添加不同濃度的三聚氰胺對(duì)各組

7、羅非魚(yú)的平均體重增長(zhǎng)無(wú)顯著影響(P>0.05)；(2)內(nèi)臟和肌肉中三聚氰胺的殘留量隨著各實(shí)驗(yàn)組飼料中添加量的增加呈顯著遞增趨勢(shì)(P<0.05),低劑量組(1000、5000 mg/kg)的內(nèi)臟和肌肉中的殘留量在2～20mg/kg間,高劑量組(10000、50000 mg/kg)的殘留量均超過(guò)40mg/kg,各組中內(nèi)臟的殘留量均顯著高于肌肉(P<0.05)。停藥5天后,羅非魚(yú)的內(nèi)臟和肌肉中三聚氰胺的含量均內(nèi)顯著下降,各實(shí)驗(yàn)組的三聚氰胺殘留