犬類肩袖損傷修復模型的構(gòu)建.pdf

1、目的：
　　在完成犬類肩袖損傷修復制動模型的基礎(chǔ)上，我們提出使用比格犬自體半腱肌擴張部作為增強修補膜片進行修補術(shù)，自體半腱肌擴張部不僅可以提供一個類似于生物支架的支撐結(jié)構(gòu)，同時自體半腱肌的應用還可以有效的避免生物兼容性問題，因此，我們在犬類肩袖損傷修復制模型的基礎(chǔ)上研究自體半腱肌擴張部修復肩袖損傷的可行性。
　　方法：
　　1.犬類肩袖損傷修復制動模型的建立
　　麻醉:首先使用速眠新2號0.08～0.10 mg/

2、kg通過比格犬臀部肌肉注射，必要時配合觀察動物麻醉反應調(diào)整劑量。待動物四肢無力、無法行走時，再將丙泊酚注射液以0.1ml/kg的劑量推注入后肢小隱靜脈麻醉。消毒備皮:待實驗用的比格犬完全麻醉后再將實驗犬均以右側(cè)臥位放置在手術(shù)臺上，四肢捆綁于手術(shù)臺邊上的固定栓上，以防止手術(shù)過程中實驗犬蘇醒造成損傷，之后以左側(cè)肩關(guān)節(jié)大結(jié)節(jié)處為中心用剃毛器備皮約10cm*10cm范圍，再用碘伏無菌消毒、鋪單。肩袖處理:取左側(cè)肱骨大結(jié)節(jié)的正中切口，測量長約3-

3、5cm，鈍性分離皮下、結(jié)締組織層，牽開肱二頭肌，充分暴露肱骨大結(jié)節(jié)-岡下肌腱連接部。用尖刀片在止點處游離岡下肌腱;精細修剪岡下肌腱末端。然后在肱骨大結(jié)節(jié)上清理殘余的岡下肌腱末端，對肱骨大結(jié)節(jié)的岡下肌止點骨皮質(zhì)層進行去表面皮質(zhì)化處理，再用1mm的克氏針在肱骨大結(jié)節(jié)上打2個骨孔。用愛惜邦縫合線，以Mason-Allen縫合法經(jīng)骨隧道重建岡下肌止點，沖洗手術(shù)切口無活動性出血后，用不可吸收線依次關(guān)閉皮下組織層及皮膚，適當加壓包扎創(chuàng)口，用手術(shù)刀片

4、于肱骨干及尺骨敢中段合適位置行兩處長約4cm縱行切口，再用止血鉗鈍性分離肌肉組織，探查到肱骨及尺骨位置后，用電鉆于肱骨干及尺骨干中段合適位置各鉆入兩枚粗細合適的外固定針，確認外固定針穿透兩層皮質(zhì)骨固定穩(wěn)定之后，再安裝外固定架及連接桿后用扳手擰緊螺絲，確認外固定支架牢固。
　　2.犬類自體半腱肌擴張部修復肩袖損傷的研究
　　首先用速眠新2號0.08～0.10 mg/kg通過比格犬臀部肌肉注射，必要時配合觀察動物麻醉反應調(diào)整劑量

5、，待動物四肢無力、無法行走時，再將丙泊酚注射液以0.1ml/kg的劑量推注入后肢小隱靜脈麻醉，待比格犬完全麻醉，后將麻醉后的比格犬以右側(cè)臥位放置在手術(shù)架上，并用繃帶將比格犬四肢及嘴部捆扎以防術(shù)中比格犬蘇醒造成損傷，之后用剃毛器備皮左側(cè)肩關(guān)節(jié)需手術(shù)區(qū)域，再無菌消毒、鋪單處理。取左側(cè)肱骨大結(jié)節(jié)為中心的正中切口，測量長約3-5cm，鈍性分離皮下、結(jié)締組織層，牽開肱二頭肌，充分暴露肱骨大結(jié)節(jié)-岡下肌腱連接部。用尖刀片在止點處游離岡下肌腱;精細修

6、剪岡下肌腱末端。然后在肱骨大結(jié)節(jié)上清理殘余的岡下肌腱末端，對肱骨大結(jié)節(jié)的岡下肌止點骨皮質(zhì)層進行去表面皮質(zhì)化處理，直至出現(xiàn)血液從松質(zhì)骨中滲出，再用1mm的克氏針在肱骨大結(jié)節(jié)原岡下肌止點出鉆出2個骨孔。用愛惜邦不可吸收縫合線，以 Mason-Allen縫合法經(jīng)骨隧道重建岡下肌止點。用組織剪于離斷岡下肌肌腱末端5mm處剪斷模擬退縮型肩袖損傷，取自體半腱肌擴張部覆蓋于肩袖損傷處模擬半腱肌修補退縮型肩袖損傷組。所有比格犬均用外固定架于尺骨干和肱骨

7、干上鉆孔固定肘關(guān)節(jié)于屈曲位6周，沖洗手術(shù)切口后，用不可吸收線依次關(guān)閉皮下組織層及皮膚，適當加壓包扎創(chuàng)口。術(shù)后即刻至術(shù)后3天，臀部肌注注射用青霉素80萬單位預防感染。
　　3.大致形態(tài)觀察
　　所有實驗犬觀察6周后在麻醉下于腿部靜脈行空氣栓塞處死，采集所有修補后的肩關(guān)節(jié)，并且剔除多余的肌肉及骨骼組織，制作成岡下肌-肱骨復合體，肉眼下觀察岡下肌肌腱止點處肌腱愈合及走形情況，鑒定各組比格犬岡下肌肌腱的愈合及生長情況。
　　4

8、.生物力學檢測
　　所有實驗犬觀察6周后在麻醉下于腿部靜脈行空氣栓塞處死，采集所有修補后的肩關(guān)節(jié)，并且剔除多余的肌肉及骨骼組織，制作成岡下肌-肱骨復合體，再放置于生物力學測試儀器中設(shè)置合適的程序行生物力學測試，主要為循環(huán)負荷測試和極限負荷測試，以鑒定各組比格犬岡下肌肌腱愈合后所產(chǎn)生的生物力學強度。
　　5.組織學檢測
　　同時取修復后的岡下肌-肱骨復合體中岡下肌肌腱止點處組織，制作成蠟片后行Masson染色，以便于觀察

9、各組比格犬中岡下肌肌腱細胞增殖和排列情況。
　　結(jié)果：
　　1.大體形態(tài)觀察
　　使用半腱肌修補組中岡下肌肌腱雖然肌腱走形已經(jīng)畸形并且覆蓋有白色疤痕組織，但其大致走向及肌腱紋理仍然可以觀察到（圖7）;普通肩袖損傷組中岡下肌肌腱末端疤痕組織明顯多于正常的肌腱組織（圖8）;在退縮型肩袖損傷組中岡下肌肌腱末端未見明顯肌腱組織，用鑷子輕輕撥開周圍疤痕組織仍未見明顯肌腱成分（圖9）。
　　2.生物力學測試
　　將各組

10、肩袖樣本肌肉端置于干冰盒內(nèi)，肌腱止點處于常溫中，待肌肉部分凝固成塊狀后放置于生物力學測試機上，標本固定后加載3N前負荷，調(diào)整負荷為8N-50N，固定往復位移1mm，頻率0.25Hz循環(huán)牽拉40周。然后以1mm/s的前進位移牽拉岡上肌腱至拉斷（圖10、11、12），記錄生物力學測試過程中各組肌腱組織所能承受的最終負荷，結(jié)果顯示在同樣是退縮型肩袖損傷組中運用于自體半腱肌擴張部修補組所能承受的最終負荷要優(yōu)于沒有運用自體半腱肌擴張部修補組。

11、r>　　3.Masson染色結(jié)果
　　所有實驗犬岡下肌肌腱止點處Masson染色結(jié)果顯示（放大20倍），普通肩袖損傷組（圖13）肌腱纖維排布大致正常;退縮型肩袖損傷組（圖14）肌腱纖維排布較為紊亂，并且肌腱細胞數(shù)目明顯要低于前組;半腱肌修補組（圖15）染色結(jié)果顯示不僅肌腱纖維排布整齊而且細胞數(shù)目也比退縮型肩袖損傷組要多。
　　結(jié)論：
　　1.利用外固定支架固定修復后的犬類肩關(guān)節(jié)可以有效的避免影響肩袖修復的外界因素，接近