采用mRNA差異顯示技術(shù)分離家蠅幼蟲(chóng)免疫相關(guān)基因的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、昆蟲(chóng)雖然沒(méi)有像高等生物那樣的特異性免疫系統(tǒng),但在受到病原體感染后,體內(nèi)能產(chǎn)生多方面的生理生化反應(yīng),抑制或殺死病原體。家蠅(Muscadomestica)在昆蟲(chóng)中占有極其重要的地位,表現(xiàn)出極強(qiáng)的適應(yīng)惡劣環(huán)境的能力,對(duì)其免疫防御系統(tǒng)的研究具有非常重要的理論意義和實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。 本文采用mRNA差異顯示PCR技術(shù),對(duì)比了家蠅幼蟲(chóng)在受到大腸桿菌(Escherichiacoli)感染后,基因表達(dá)發(fā)生的變化。通過(guò)對(duì)差異片段的回收,克隆測(cè)序,

2、Northern點(diǎn)雜交驗(yàn)證,最終確定了10個(gè)誘導(dǎo)后差異表達(dá)的真陽(yáng)性cDNA片段,其長(zhǎng)度為140-824bp不等。經(jīng)GenBank同源性分析發(fā)現(xiàn),這10個(gè)片段的氨基酸翻譯序列分別與不同物種的不同氨基酸序列有較高的同源性。YG20-600翻譯的氨基酸序列與意大利蜜蜂的酚氧化酶原激活因子有36%的同源性(E值為4e-22);YG5-370翻譯的氨基酸序列與棕尾別麻蠅的前脂肪體蛋白有高達(dá)92%的同源性(E值為4e-54);YA24-190翻譯的

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