T-B淋巴細胞亞群在肥胖2型糖尿病患者胃旁路手術中的作用及臨床意義.pdf

1、隨著全球經(jīng)濟發(fā)展，糖尿病患病率飛速增加。上海交通大學的一項調(diào)查增加了我們的憂慮。調(diào)查顯示，2010年我國糖尿病患病率已增加至11.6％，糖尿病總?cè)藬?shù)已高達9240萬。因此可以預測我國衛(wèi)生醫(yī)療負擔將會在這方面面對很大壓力。此外，在世界許多國家，尤其是美國，肥胖人數(shù)增加，體力活動減少以及老齡化進一步增加了2型糖尿病的患病率。目前，盡管藥物治療不斷進步，2型糖尿病患者用藥后的血糖達標率實際不足40％，對于糖尿病合并癥的控制也不理想。而且，口服

2、降糖藥物和胰島素可能因為導致增重而進一步影響對機體代謝的控制，不僅如此，多藥物聯(lián)合治療既加重了患者的經(jīng)濟負擔也加重了器官損害。2型糖尿病，尤其是肥胖2型糖尿病患者的管理成為內(nèi)科治療中極具挑戰(zhàn)性的難題。
　　2009年美國糖尿病協(xié)會將一項新的糖尿病治療技術——手術治療肥胖2型糖尿病寫入糖尿病指南。近幾年，經(jīng)過眾多臨床醫(yī)生驗證，手術治療肥胖2型糖尿病患者的短期療效已經(jīng)得到肯定。這提升了人們對2型糖尿病治療新的期待，這可能是治愈糖尿病的

3、一條嶄新途徑。然而，手術治療肥胖2型糖尿病的機制仍然不清楚，這成為制約手術進一步開展和推廣的瓶頸。
　　有研究表明，肥胖是一種慢性亞臨床炎癥，同時2型糖尿病存在免疫細胞紊亂，促炎性分子如TNF-α可介導肥胖所致胰島素抵抗。而手術后肥胖2型糖尿病患者胰島素抵抗緩解。炎癥、胰島素抵抗和代謝手術之間的關系尚未可知。
　　目的：
　　本研究通過流式細胞分析技術并結(jié)合免疫細胞活性檢測技術，利用臨床接受腹腔鏡胃旁路手術患者的臨床標

4、本進行實驗，分析肥胖及2型糖尿病人群T/B淋巴細胞亞群的差異及CD4+T細胞的活性在術前術后的區(qū)別。并結(jié)合臨床相關指標，分析其與有差異T/B淋巴細胞亞群的相關性，探討二者在手術治療肥胖及2型糖尿病過程中的作用及臨床意義。
　　方法：
　　一、回顧性分析26例腹腔鏡胃旁路手術患者與12例健康人組成的對照組，比較組間及各組手術前后T/B淋巴細胞亞群的差異
　　以2015年1月～2015年7月在我院代謝外科中心行代謝手術的2

5、6例腹腔鏡胃旁路手術患者進行回顧性分析，其中肥胖2型糖尿病患者10例（肥胖糖尿病組），2型糖尿病患者8例（糖尿病組），肥胖癥患者8例（肥胖組）。于我院體檢門診隨機選取12例健康的體檢人員資料用作對照組，體檢人員均無嚴重心、肝、腎及腫瘤等疾病，無過敏性及變態(tài)反應性疾病，未服用過糖皮質(zhì)激素及其它免疫抑制劑，并同時排除肥胖、2型糖尿病、感染及其他自身免疫系統(tǒng)可能異常的疾病。T/B淋巴細胞亞群分析采用MILLIPORE公司流式細胞儀(Guava

6、easyCyteHT型)操作。采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件中的單因素方差(one-wayANOVA)方法對不同組實驗數(shù)據(jù)進行多重比較，同組術前術后指標比較采用配對-t檢驗。
　　二、差異T/B淋巴細胞亞群指標與患者營養(yǎng)、糖脂代謝、腎功能指標的相關性分析
　　以第一部分篩選出來的差異T/B淋巴細胞亞群指標為研究對象，結(jié)合臨床手術前檢驗評估指標，包括營養(yǎng)指標（白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、前白蛋白）、糖代謝指標（空腹血糖、餐后2小時血糖、糖

7、化血紅蛋白、空腹胰島素、餐后2小時胰島素、空腹C肽、餐后2小時C肽）、脂代謝指標（甘油三脂、膽固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、載脂蛋白A1、載脂蛋白B）、腎功能指標（尿素氮、肌酐、尿微量白蛋白、內(nèi)生肌酐清除率），組間比較采用單因素方差(one-wayANOVA)分析，相關性分析采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件中的Person相關分析和逐步回歸分析。
　　三、胃旁路手術患者CD4+T細胞活性變化
　　收集腹腔鏡胃旁路手術后患者及

8、術前患者血標本（分為術前組和術后組），按第一部分中的方法選擇對照組。酶標儀（Molecular Devices Spectra Max M3）檢測植物血凝集素(PHA)刺激下的CD4+T細胞活性。采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件中的多個獨立樣本的非參數(shù)檢驗比較三組植物血凝集素(PHA)刺激下的CD4+T細胞活性在2h和18h的活性變化。
　　結(jié)果：
　　一、肥胖糖尿病組、糖尿病組、肥胖組和對照組中，B細胞絕對值(CD19/45)

9、
　　、B細胞(CD19+/45)的分布無差異(P＞0.05)。在四組中，糖尿病組和肥胖糖尿病組的輔助T細胞(CD4+/3)顯著高于對照組和肥胖組，糖尿病組和肥胖糖尿病組的CD4+/CD8+比率也顯著高于對照組，并且肥胖糖尿病組的CD4+/CD8+比率高于肥胖組(P＜0.05）。肥胖糖尿病組、糖尿病組和肥胖組中NK細胞(CD16+/56+/45)、NK細胞絕對值(CD16/56/45)均顯著低于對照組(P＜0.05）。
　　

10、二、肥胖糖尿病組中T細胞(CD3+)較術前有下降(69.43±6.52 vs66.89±7.74，t=2.282，P=0.048)，但下降的幅度不明顯。糖尿病組術后指標較術前變化不大，差異無統(tǒng)計學意義。肥胖組中，術后抑制T細胞絕對值(CD8/3)(853.25±360.55 vs718±303.06，t=2.49，P=0.042)、NK細胞絕對值(CD16/56/45)(391.5±113.47 vs332.38±97.58，t=2.9

11、11，P=0.023)較術前有不同程度的下降，差異有統(tǒng)計學意義。
　　三、在控制年齡、性別因素下，肥胖糖尿病組、糖尿病組、肥胖組患者在BMI、FPG、HbA1c、空腹胰島素、餐后2h C肽、高密度脂蛋白、尿素氮方面有顯著差異(P＜0.05)。
　　四、糖尿病組，CD4+/CD8+比率與尿微量白蛋白呈顯著負相關(r=-0.857，P=0.006)，NK細胞(CD16+/56+/45)與肌酐呈負相關(r=-0.843，P=0.0

12、09)。肥胖糖尿病組，輔助T細胞(CD4+/3)與轉(zhuǎn)鐵蛋白、餐后2小時胰島素顯著負相關(r1=-0.772，P1=0.009; r2=-0.827，P2=0.003)，CD4+/CD8+比率與餐后2h胰島素顯著正相關(r=0.698，P=0.025)，與餐后2h C肽、載脂蛋白B、內(nèi)生肌酐清除率顯著負相關(r1=-0.810，P1=0.004; r2=-0.701，P2=0.024; r3=-0.761，P3=0.011），NK細胞(C

13、D16+/56+/45)與轉(zhuǎn)鐵蛋白、肌酐呈顯著正相關(r1=0.889，P1=0.001;r2=0.693，P2=0.026)，NK細胞絕對值與餐后2h胰島素、尿微量白蛋白顯著正相關(r1=0.700，P1=0.024;r2=0.634，P2=0.049)。肥胖組，CD4+/CD8+比率與餐后2小時血糖負相關(r=-0.731，P=0.039)，NK細胞絕對值與甘油三酯正相關(r=0.823，P=0.012)。
　　五、在年齡、性

14、別匹配下，手術前、手術后與對照組，PHA刺激下的CD4+T細胞活性增加率在2h及18h均無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。術前組與對照組在PHA刺激下的CD4+T細胞活性增加率18h顯著高于2h(P＜0.05)，術后組在兩個時間點上的變化無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論：
　　一、2型糖尿病或肥胖糖尿病人群中，免疫系統(tǒng)被激活，全身處于一種微炎癥狀態(tài)，肥胖及T2DM患者存在免疫系統(tǒng)組分的改變即外周血中的T淋巴細胞亞群數(shù)量、