非小細(xì)胞肺癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群和Treg的檢測及臨床意義.pdf

1、背景:肺癌是世界范圍內(nèi)最常見也是惡性程度最高的惡性腫瘤之一,占所有惡性腫瘤的14％。在我國,每年有將近50萬的新發(fā)肺癌患者,其中非小細(xì)胞肺癌占肺癌的80-85％。目前肺癌治療提倡個體化綜合治療,手術(shù)、放療及化療作為腫瘤綜合治療的三大基石,使肺癌患者的生存時間得到延長,但效果并不盡如人意。報道顯示,美國肺癌的總體5年生存率低于15％,而在我國僅為10％左右。近年來,隨著腫瘤免疫學(xué)及分子生物學(xué)的不斷發(fā)展,越來越多的研究表明,惡性腫瘤的發(fā)生、

2、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)與機(jī)體的免疫功能缺陷,尤其是細(xì)胞免疫功能抑制有關(guān)。放、化療是最常用的腫瘤治療手段,但放、化療由于其不能特異性的識別腫瘤細(xì)胞,在對腫瘤細(xì)胞發(fā)揮殺傷作用的同時,也對正常的淋巴細(xì)胞進(jìn)行殺傷。淋巴細(xì)胞是機(jī)體的主要免疫細(xì)胞,淋巴細(xì)胞減少會引起機(jī)體抗腫瘤免疫功能降低。T淋巴細(xì)胞作為機(jī)體最為重要的免疫應(yīng)答的參與者,其亞群的分布及功能也一直是醫(yī)學(xué)界研究的熱點(diǎn)。CD4+CD25+Treg細(xì)胞是T淋巴細(xì)胞的一個亞型,已有多項(xiàng)研究證實(shí)Treg

3、細(xì)胞在維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定、腫瘤免疫監(jiān)視、預(yù)防自身免疫性疾病以及誘導(dǎo)器官移植耐受等方面發(fā)揮了極其重要的保護(hù)作用。同時亦有研究發(fā)現(xiàn)Treg細(xì)胞在腫瘤免疫耐受和免疫抑制等方面扮演了重要的角色。關(guān)于T淋巴細(xì)胞亞群及Treg細(xì)胞在腫瘤治療中的臨床意義值得進(jìn)一步的研究探討。
　　 目的:本研究通過流式細(xì)胞術(shù)對非小細(xì)胞肺癌患者放、化療前后外周血中T淋巴細(xì)胞亞群的分布及CD4+CD25+Treg細(xì)胞的水平進(jìn)行檢測,研究T淋巴細(xì)胞亞群及CD4+

4、CD25+Treg細(xì)胞在非小細(xì)胞肺癌不同治療方式前后的變化,研究其與效果及預(yù)后是否有關(guān),并進(jìn)一步探討其臨床意義。
　　 方法:
　　 1、收集河北省人民醫(yī)院腫瘤科2011.7-2012.09期間初治非小細(xì)胞肺癌患者54例,所有患者均經(jīng)病理確診。男性39例,女性15例,年齡36-79歲,平均年齡72.8±9.22歲;中位年齡74.2歲;鱗癌25例,腺癌29例;高分化5例,中分化24例,低分化25例;按2009最新的國際肺癌

5、研究會(IASLC)肺癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn):Ⅰ期2例,Ⅱ期9例,Ⅲ期27例,Ⅳ期16例;單純放療組25例,同步放、化療組29例。收集河北省人民醫(yī)院健康體檢者10例作為對照,其中男性12例,女性8例,年齡29-76歲,平均年齡67.8±12.0歲,中位年齡70.4歲。
　　 2、抽取肺癌患者放療前及放療結(jié)束次日晨起空腹外周靜脈血3ml。
　　 3、流式細(xì)胞儀檢測T淋巴細(xì)胞亞群分布及Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比值。
　

6、　 4、對入組患者進(jìn)行療效評價及隨訪。
　　 5、計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS16.(O)軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)處理分析,兩樣本均數(shù)比較用t檢驗(yàn),多個樣本均數(shù)兩兩比較采用單因素方差分析,相關(guān)性檢驗(yàn)選擇Spearman等級相關(guān)分析,應(yīng)用Kaplan-Meier進(jìn)行生存分析,P＜0.05為有顯著性差異。
　　 結(jié)果:
　　 1、非小細(xì)胞肺癌患者與健康對照組外周血中T淋巴細(xì)胞亞群及Treg比

7、較:
　　 非小細(xì)胞肺癌患者外周血CD3+T、CD4+T、CD4+T/CD8+T均明顯低于健康對照組,而CD8+T明顯高于健康對照組,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義。(P＜0.05)
　　 非小細(xì)胞肺癌患者外周血Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比值(8.62±2.16)％明顯高于健康對照組(2.18±1.36)％,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)
　　 2、非小細(xì)胞肺癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群及Treg與臨床特點(diǎn)的關(guān)系:

8、r>　　 T淋巴細(xì)胞亞群的分布及Treg水平與患者性別、年齡及腫瘤病理類型無關(guān);與病理分期有關(guān),Ⅰ-Ⅱ期患者CD3+T、CD4+T、CD4+T/CD8+T均高于Ⅲ-Ⅳ期患者,而CD8+T、Treg明顯低于Ⅲ-Ⅳ期患者,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 3、非小細(xì)胞肺癌患者治療前后外周血T淋巴細(xì)胞亞群及Treg的變化及其對生存期的影響:
　　 單純放療組患者測定的結(jié)果:放療后CD3+T、CD4+T、CD4+T/CD8+T及Tre

9、g較放療前有所下降,而CD8+T較前有所升高,但差異無統(tǒng)計意義。
　　 同步放化療組患者測定的結(jié)果:治療后CD3+T、CD4+T及CD4+T/CD8+T及Treg較治療前明顯下降,而CD8+T較前有所升高,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 同步放化療組較單純放療組CD3+T、CD4+T、CD4+T/CD8+T及Treg下降更明顯,而CD8+T升高更明顯,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 同步放化療組較單純放療組治療有效率(C