馬鈴薯鐮孢菌病害病原菌的分離與鑒定及其藥劑敏感性研究.pdf

1、馬鈴薯鐮孢菌病害是近年來影響馬鈴薯生產(chǎn)的一類重要的病害，其主要在生長期表現(xiàn)為馬鈴薯枯萎病，儲藏期表現(xiàn)為馬鈴薯干腐病。病害造成的經(jīng)濟損失，一般年份能達到20％-50%，嚴重的年份可達70%。針對日漸嚴重的馬鈴薯鐮孢菌病害，本研究從內(nèi)蒙古和山東省采集了馬鈴薯田間枯萎病株及干腐病病薯，通過組織分離法獲得了相應的病原菌，結合形態(tài)學特性和分子生物學方法，初步明確了當前影響馬鈴薯生產(chǎn)的鐮孢菌病害種類、優(yōu)勢種及其主要生物學性狀，取得的以下結果：

2、>　　1.從疑似馬鈴薯枯萎病株及干腐病薯塊，用組織分離法獲得了152個純化的鐮孢菌菌株，其中從田間枯萎病株上分離到62個菌株，從塊莖上分離到90個菌株。通過單孢挑取法獲得各菌株的單孢菌落，應用CTAB法提取了各單孢菌株的總DNA，PCR擴增獲得了各自的ITS和β-tubulin目的片段，經(jīng)測序和BLAST分析，分別構建了獲得菌株與BLAST相關菌株的ITS序列和β-tubulin序列的系統(tǒng)進化樹；綜合形態(tài)學、生物學特性和分子生物學方法分

3、析，這些菌株主要包括尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum），接骨木鐮刀菌（F. sambucinum），茄病鐮刀菌（F. solani），銳頂鐮刀菌（F. acuminatum），三線鐮刀菌（F. tricinctum），木賊鐮刀菌（F. equiseti）和層生鐮刀菌（F. proliferatum)等7種鐮刀菌，其中從田間枯萎病株上分離到鐮孢菌種類有：尖孢鐮刀菌（50株，占80.64%），接骨木鐮刀菌（2株，占3.22%

4、），層生鐮刀菌（5株，占8.06%），木賊鐮刀菌（1株，占1.61%），茄病鐮刀菌（2株，占3.22%）和三線鐮刀菌（2株，占3.22%）等6個鐮刀菌株系；從干腐病薯上分離的鐮孢菌有：尖孢鐮刀菌（21株，占23.33%），接骨木鐮刀菌（36株，占40.00%），層生鐮刀菌（8株，占8.89%），木賊鐮刀菌（13株，占14.44%），茄病鐮刀菌（2株，占2.22%），三線鐮刀菌（4株，占4.44%）和銳頂鐮刀菌（6株，占6.67%）等7個

5、鐮孢菌株系。綜合田間植株和塊莖上所分離的病原菌，得到最多的鐮孢菌是尖孢鐮刀菌分離71株，占總分離到病原菌的46.71%，得到接骨木鐮刀菌分離38株，占總分離到病原的25%。初步明確了枯萎病植株和干腐病薯上鐮孢菌的種類、占比以及這些鐮孢菌之間的親緣關系。
　　2.選擇馬鈴薯克新1號，夏波蒂，大西洋，冀張薯8號，青薯9號，費烏瑞它，魯引1號7個品種進行了馬鈴薯對所分離病原菌的抗性測定。所試品種塊莖在30天時接種接骨木鐮刀菌表皮病斑非常

6、明顯；接種60天時切開馬鈴薯塊莖，發(fā)現(xiàn)接種接骨木鐮刀菌的馬鈴薯全部感病，而接種其他6種鐮孢菌的馬鈴薯，只是部分塊莖表現(xiàn)出現(xiàn)維管束變黑現(xiàn)象。
　　3.選取生產(chǎn)實踐常用的4種殺菌劑進行測室內(nèi)抑菌的藥效實驗，采用室內(nèi)菌絲生長速率法，發(fā)現(xiàn)四種藥劑對尖孢鐮刀菌和接骨木鐮刀菌的抑菌濃度間都存在顯著差異（P＜0.05）；回歸分析結果表明：百菌清對尖孢鐮刀菌的抑制效果最明顯，EC50值為23.222μg/ml；噁霉靈效果最弱，EC50值為273.