褐飛虱和灰飛虱幾丁質(zhì)合成酶及其兩個可變外顯子的研究.pdf

1、幾丁質(zhì)合成酶（CHS）在昆蟲表皮及其它合成幾丁質(zhì)的組織中發(fā)揮著重要的作用。在本研究中，通過RT-PCR和3'-RACE方法克隆得到了兩種稻飛虱—褐飛虱及灰飛虱CHS的eDNA序列。通過系統(tǒng)進化樹分析，兩者都屬于CHS1。據(jù)目前的報道，大部分昆蟲都有兩種類型的CHS（CHS1和CHS2），但通過褐飛虱基因組和轉(zhuǎn)錄組的研究分析和驗證發(fā)現(xiàn)褐飛虱僅存在一個CHS-CHS1。不論是褐飛虱還是灰飛虱CHS1中都存在兩個可變剪切，產(chǎn)生兩個轉(zhuǎn)錄本（CH

2、S1a和CHS1b），在褐飛虱中位于外顯子19a和19b，而且通過對7種昆蟲基因組結(jié)構(gòu)的比較發(fā)現(xiàn)，除了蚜蟲之外都含有兩個可變剪切。褐飛虱可變外顯子a在剛蛻皮的時候相對轉(zhuǎn)錄水平最高，外顯子b通常在蛻皮前1-2天達到最高。通過顯微注射的方法對褐飛虱進行RNAi實驗，不論是沉默CHS1，CHSa和CHSb，都能下調(diào)其轉(zhuǎn)錄水平，并產(chǎn)生了隨后的表型。沉默CHS1和CHSa產(chǎn)生了畸形致死的表型，而沉默CHS1b雖然導致死亡率有所上升，但沒有被觀察到