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文檔簡(jiǎn)介
1、褐飛虱(Nilaparvata lugens(St(a)l))是水稻上一種非常重要的刺吸式口器害蟲。作為近年來(lái)褐飛虱田間防治的常用殺蟲劑,吡蚜酮一直被認(rèn)為是通過(guò)抑制褐飛虱對(duì)韌皮部的取食使其饑餓而死,而近期研究表明吡蚜酮可能作用于昆蟲TRPV通道(Transient receptor potential vaniloid channel,瞬時(shí)感受器電位香草酸受體亞型通道)。本研究通過(guò)RNA干擾的方法沉默褐飛虱TRPV通道兩個(gè)亞型Inact
2、ive(Iav)和Nanchung(Nan)的基因,結(jié)果表明褐飛虱TRPV通道與取食行為關(guān)系密切。具體結(jié)果如下:
1.克隆褐飛虱Nan和Iav基因,分別與果蠅和豌豆蚜的Nan基因和Iav基因進(jìn)行序列比對(duì)。其中,Iav基因克隆片段與豌豆蚜和果蠅Iav基因相似度分別為83%和85%; Nan基因克隆片段與豌豆蚜和果蠅的相似度分別為85%和83%。進(jìn)一步驗(yàn)證克隆所得片段即分別為褐飛虱Iav和Nan基因片段。
2.將褐飛虱分
3、別注射dsIav和dsNan1 d和3d后,Iav和Nan基因的表達(dá)量顯著低于注射dsGFP的褐飛虱。Iav干擾后統(tǒng)計(jì)褐飛虱7d內(nèi)的存活率,結(jié)果表明,第3d和第4d存活率顯著低于對(duì)照,而其他天數(shù)與對(duì)照相比無(wú)顯著差異,而Nan基因干擾之后褐飛虱7d之后存活率僅為26.67%,顯著低于對(duì)照的存活率;RNA干擾后,褐飛虱的足均無(wú)異常情況。
3.Iav基因和Nan基因干擾后,通過(guò)EPG監(jiān)測(cè)成蟲在水稻植株上的取食,結(jié)果表明,Iav和Na
4、n基因干擾之后褐飛虱韌皮部取食均受到抑制。其中,Iav基因干擾后,口針的刺探次數(shù)和路徑波時(shí)間延長(zhǎng)而韌皮部取食時(shí)間和刺探次數(shù)顯著低于對(duì)照。Nan基因干擾后,與對(duì)照相比木質(zhì)部取食時(shí)間和非刺探時(shí)間延長(zhǎng),而韌皮部的取食時(shí)間和韌皮部刺探次數(shù)降低。
4.將RNA干擾之后的褐飛虱通過(guò)EPG監(jiān)測(cè)成蟲對(duì)液態(tài)飼料取食,發(fā)現(xiàn)Iav基因和Nan基因干擾后對(duì)蔗糖溶液的取食與對(duì)照相比均無(wú)顯著差異。
綜上所述,褐飛虱TRPV兩個(gè)亞型基因的沉默會(huì)抑
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