RP-HPLC測定大鼠體內D、L-神經興奮型氨基酸的含量.pdf

1、目的：
　　建立一種同時測定大鼠血清和腦組織中D、L-天門冬氨酸、谷氨酸和絲氨酸的高效液相色譜法，通過比較正常組與抑郁模型組血清和腦組織中氨基酸含量的差異，研究探索神經興奮型氨基酸與抑郁癥的關系。
　　方法：
　　柱前手性衍生化試劑：鄰苯二甲醛(OPA)和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)；色譜條件：色譜柱：Phenomenex C18(250mm×4.6mm，5μm)；流動相：50mmol/L醋酸銨(pH6.8)-甲醇

2、(96:4，v/v)，流速：1mL/min；熒光檢測波長：Ex350nm，Em450nm。
　　結果：
　　D、L-天門冬氨酸、谷氨酸和絲氨酸三對對映異構體衍生物的分離度為1.21、2.20和1.53，且不受其他氨基酸異構體和內源性物質的干擾；D、L-天門冬氨酸、D-氨基酸在5～1000ng/mL范圍內線性關系良好，相關系數(shù)r≥0.9997；L-氨基酸在25～5000ng/mL范圍內線性關系良好，相關系數(shù)r≥0.9998。應

3、用此方法能準確測定大鼠血清和腦組織中三對神經興奮型氨基酸對映體的含量。
　　結論：
　　建立了一種準確、可靠且靈敏度高的測定生物樣品中D、L-天門冬氨酸、D、L-谷氨酸和D、L-絲氨酸的分析方法，通過對照組與抑郁模型組實驗測定結果的分析比較，發(fā)現(xiàn)在抑郁模型組的血清和下丘腦中L-絲氨酸含量明顯降低，而D-絲氨酸含量明顯升高，且有顯著性差異(P<0.05)，而谷氨酸和天門冬氨酸的變化并不明顯。血清中L-絲氨酸含量明顯降低，或D-