RP-HPLC法測定化妝品中黃芪、甘草、丹參有效成份的研究.pdf

1、當今世界化妝品的發(fā)展趨勢是倡導綠色、環(huán)保和安全并追求功效,近年來,以作用溫和又具有一定功效的中草藥提取物為天然添加劑應用于化妝品中已成為新產品開發(fā)的熱點。目前國家有關部門對化妝品的質量管理,僅限于對化妝品的安全性方面的檢測,而對中草藥化妝品有效成份的定性定量分析,尚屬空白。本文利用衍生化試劑,對于黃芪主要功效成份—黃芪甲苷和甘草的主要功效成份—甘草酸進行了柱前衍生,首次建立了反相高效液相色譜測定化妝品中黃芪甲苷、甘草酸、丹參酮ⅡA(丹參

2、功效成份)的方法。詳細考察了衍生化反應及色譜分離分析的最佳條件。通過單因素分析,討論了衍生化試劑的用量、衍生化反應時間、衍生化反應溫度對衍生化反應效果的影響,優(yōu)化了最佳衍生化反應條件;通過對流動相、流速、柱溫及檢測波長的研究,優(yōu)化了最佳色譜分離分析條件。在最佳衍生化和色譜條件下,建立了黃芪甲苷、甘草酸和丹參酮ⅡA的反相高效液相色譜測定法,考察了所建方法的線性范圍、精密度、檢出限和準確度,并將所建方法用于三種草藥提取液和含三類草藥化妝品中

3、相應功效成份的分析,研究了所建方法的可行性。同時考察了所建方法用于實際樣品測試的重現(xiàn)性。對于黃芪甲苷,以3,5-二硝基苯甲酰氯為柱前衍生化試劑,Phenomemex C18(5μm,4.6mm×150mm)柱分離,甲醇:0.01mol·L-1磷酸二氫鉀(H3PO4調節(jié)pH=3.5)=60:40(v/v)洗脫,紫外(230nm)檢測。所建黃芪甲苷分析方法的線性范圍為5.0~100.0μg·mL-1,回歸方程為y=478944+2132x(

4、其中y為衍生物的峰面積,x為黃芪甲苷的濃度),相關系數(shù)R=0.9986,精密度為1.56％(c=40.0μg·mL-1,n=6),檢出限為1.2μg·mL-1,平均加標回收率為98.6%。對于甘草酸,用對硝基溴化芐作為柱前衍生化試劑,PhenomemexC18(5μm,4.6mm×150mm)柱分離,乙腈:3%冰醋酸=60:40(v/v)為流動相,紫外(290nm)檢測。柱溫為室溫,流速為1.0mL·min-1。所建甘草酸分析方法的線性

5、范圍為10.0~100.0μg·mL-1,回歸方程為y=4032x+269413(其中y為衍生物的峰面積,x為甘草酸的濃度),相關系數(shù)R=0.9951,精密度為1.67%(c=10.0μg·mL-1,n=6),檢出限為1.5μg·mL-1,平均加標回收率為97.7%。對于丹參酮ⅡA,本文采用Phenomemex C18(5μm,4.6mm×150mm)柱分離,甲醇:水=85:15(v/v)洗脫,紫外(270nm)檢測,柱溫為30℃,流速