健胃補脾湯抗小鼠乙醇性胃黏膜損傷作用的研究.pdf

1、目的：
　　本課題通過動物實驗，觀察方劑健胃補脾湯對乙醇性小鼠胃黏膜損傷保護作用及相關(guān)作用機制，探究健胃補脾湯發(fā)揮保護作用的可能機制，為健胃補脾湯對乙醇性胃黏膜損傷保護作用的分子機制提供直接的實驗依據(jù)，并且為乙醇性胃黏膜損傷性胃潰瘍（GU）的預防與治療提供新的藥物防治思路，為臨床治療乙醇性胃黏膜損傷類疾病提供指導和客觀依據(jù)。
　　方法：
　　1、清潔級（Ⅱ級）健康小白鼠96只，體重25-30g不等，雌雄各半，由浙江中醫(yī)

2、藥大學實驗中心提供。將其稱重后編號，隨機分成6組，每組雌雄各半，分別為正常對照組、模型對照組、陽性對照組(給予灌胃對胃黏膜損傷有保護作用的西咪替丁)、保護組（包括中藥低劑量組、中藥中劑量組和中藥高劑量組三組），每組小鼠均為16只。
　　2、建立小鼠乙醇性胃黏膜損傷模型。正常對照組給予動物生理鹽水灌胃7天，劑量8ml/kg鼠重；模型對照組首先給予動物生理鹽水灌胃兩天，劑量8ml/kg鼠重，于第三天開始灌胃55％的乙醇，每天給藥一次，

3、8ml/kg鼠重，連續(xù)5天；陽性對照組給予Cim7mg/Kg，其劑量由臨床常用劑量折算得來。該劑量為大量文獻常用劑量，已獲得認可劑量。中藥保護組：分別給予小鼠低、中、高劑量（3ml/kg，6ml/kg，9ml/kg）的健胃補脾湯灌胃7天，于第3天灌胃健胃補脾湯預保護后2h開始灌胃55%乙醇，每天給藥一次，連續(xù)5天。上述各組按照描述給藥方法連續(xù)給藥7d，每日一次。在第六天灌胃結(jié)束后，立即實施禁食不禁水24h。處死，從病理形態(tài)學進一步觀察健

4、胃補脾湯對乙醇致小鼠胃黏膜損傷的保護作用，并檢測各組小鼠血清中一氧化氮（NO）、血漿前列腺素E2（PGE2）以及Ⅱ相酶中醌還原酶（quninone reductase,QR）的含量，探討健胃補脾湯防治小鼠乙醇性胃黏膜損傷的相關(guān)分子機制。
　　3、應用免疫組化法檢測小鼠胃黏膜組織中誘導型一氧化氮合酶（iNOS）的平均光密度值的變化，根據(jù)其數(shù)值的變化，來探討健胃補脾湯發(fā)揮作用的調(diào)控機制。
　　4、進行Pearson相關(guān)性分析，分

5、析健胃補脾湯與小鼠血清NO、PGE2、QR濃度及胃黏膜iNOS平均光密度值變化的相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　1、根據(jù)動物實驗所得損傷率及損傷抑制率，可得出陽性對照組以及各中藥治療組均能顯著抑制小鼠乙醇性胃黏膜損傷的發(fā)生，中藥中劑量組與中藥高劑量組對乙醇性胃黏膜損傷的抑制作用均明顯強于陽性對照組（p＜0.05），具有統(tǒng)計學意義。
　　2、通過對健胃補脾湯對小鼠血清中NO含量變化的分析，可得知血清NO含量，模型對照組與中藥低

6、劑量治療組血清中NO含量明顯低于正常對照組，且具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）；中藥低劑量組血清NO含量雖然高于模型對照組，但是不具有統(tǒng)計學意義（p＞0.05）；正常對照組、陽性對照組、中藥中、高劑量組血清NO含量比模型對照組要高，且具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）；與陽性對照組相比，中藥中、高劑量組血清 NO含量升高，且具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）。說明中、高劑量的健胃補脾湯能使NO含量升高，從而起到對乙醇性胃黏膜損傷的保護作用。

7、>　　3、通過對健胃補脾湯對小鼠血清中PGE2含量變化的分析，可得知血清PGE2含量，模型對照組與中藥低劑量治療組血清中PGE2含量明顯低于正常對照組，且具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）；中藥低劑量組血清PGE2含量雖然高于模型對照組，但是不具有統(tǒng)計學意義（p＞0.05）；正常對照組、陽性對照組、中藥中、高劑量組血清PGE2含量比模型對照組要高，且具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）；與陽性對照組相比，中藥中、高劑量組血清PGE2含量升高，且具

8、有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）。說明中、高劑量的健胃補脾湯能使PGE2含量升高，從而起到對乙醇性胃黏膜損傷的保護作用。
　　4、通過對健胃補脾湯對小鼠血清中QR含量變化的分析，可得知血清QR含量，模型對照組與中藥低劑量治療組血清中QR含量明顯低于正常對照組，且具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）；中藥低劑量組血清QR含量雖然高于模型對照組，但是不具有統(tǒng)計學意義（p＞0.05）；正常對照組、陽性對照組、中藥中、高劑量組血清QR含量比模型對照

9、組要高，且具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）；與陽性對照組相比，中藥中、高劑量組血清QR含量升高，且具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）。說明中、高劑量的健胃補脾湯能使QR含量升高，從而起到對乙醇性胃黏膜損傷的保護作用。
　　5、本實驗中所得數(shù)據(jù)顯示，與正常對照組相比，模型對照組與各中藥劑量組小鼠胃黏膜組織中（iNOS）平均光密度值均有不同程度升高，差異有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）；與陽性對照組相比，中藥中高劑量組的（iNOS)平均光密度值

10、均有不同程度升高，差異有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）；中藥低劑量組iNOS平均光密度值雖高于模型對照組，但無統(tǒng)計學意義（p＞0.05）；中藥中劑量組與高劑量組iNOS平均光密度值均高于模型對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）。說明中、高劑量的健胃補脾湯對于胃黏膜iNOS的表達有促進作用，從而對胃黏膜損傷起到保護作用。
　　6、本研究通過進行Pearson相關(guān)性分析，得出健胃補脾湯濃度與血清NO、PGE2、QR濃度及胃黏膜iNO

11、S平均光密度值的變化存在相關(guān)性，且成正相關(guān)；具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05），提示健胃補脾湯具有保護乙醇性胃黏膜損傷的作用。
　　結(jié)論:
　　1、通過動物實驗，得出上述結(jié)果，提示健胃補脾湯在一定程度上能夠防治乙醇對小鼠胃黏膜的損傷，是防治小鼠乙醇性胃黏膜損傷的有效藥物。
　　2、健胃補脾湯對小鼠乙醇性胃黏膜損傷的保護作用可能是通過增加小鼠血清中NO、PGE2、QR及胃黏膜中iNOS的含量來實現(xiàn)的，從而使胃黏膜血管舒張，增