樹(shù)脂DEAE-E-H固定化氨基?；傅难芯颗c乙酰-DL-蛋氨酸酶拆分液分離.pdf

1、本文系統(tǒng)地測(cè)定了樹(shù)脂DEAE-E/H的各種物理與化學(xué)參數(shù)對(duì)酶固定化可能產(chǎn)生的影響；最終選定樹(shù)脂8/4/12作為氨基?；傅墓潭ɑd體并作吸附研究和固定化酶評(píng)價(jià)；改進(jìn)了乙酰-DL-蛋氨酸的酶拆分液分離工藝，從而提高了分離效率和產(chǎn)品純度。 固定化載體決定固定化酶的酶活和性質(zhì)，因此本文從載體篩選入手，在已有實(shí)驗(yàn)研究的基礎(chǔ)上，選擇樹(shù)脂DEAE-E/H系列的三個(gè)產(chǎn)品：12/4/12、8/4/12、4/4/6為研究對(duì)象，從功能基含量，比表面

2、，孔徑分布，交聯(lián)度，固定化酶活等多方面比較，最終選定樹(shù)脂8/4/12作為氨基?；傅墓潭ɑd體，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)固定化酶活最高可達(dá)956U/g。通過(guò)對(duì)比實(shí)驗(yàn)分析確定，自由酶溶液濃度為2.0mg/ml時(shí)，能使固定化酶活和酶活力收率同時(shí)達(dá)到峰值；振蕩吸附達(dá)到最佳效果的時(shí)間確定為8小時(shí)。在測(cè)定吸附等溫線(xiàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)酶蛋白吸附屬非單分子層吸附，并且上柱循環(huán)固定化的效果要好于振蕩固定化。考察了固定化酶的最適反應(yīng)溫度、pH值、熱穩(wěn)定性等反應(yīng)條件，確定固定化氨

3、基?；笇?duì)乙酰-DL-蛋氨酸的拆分沒(méi)有明顯的底物抑制現(xiàn)象。采用陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱對(duì)乙酰-DL-蛋氨酸的酶拆分液進(jìn)行分離，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)這一工藝不僅可以有效地分離純化L-蛋氨酸，還可以兼得乙酰-D-蛋氨酸，且二者的收率分別達(dá)到了85％以上和75％左右。最后提出了雙柱耦聯(lián)模型，以期獲得更高的拆分效率。 總之，通過(guò)對(duì)樹(shù)脂載體物理和化學(xué)性能的研究，不僅可以在一定程度上預(yù)測(cè)它作為載體的效果，也為拆分氨基酸工藝的改進(jìn)提供了理論依據(jù)。固定化酶的反