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1、樹枝狀大分子(Dendrimer)是一類新型的功能高分子化合物,它的特點(diǎn)是可以在分子水平進(jìn)行分子的大小、形狀和功能基團(tuán)的設(shè)計(jì)。把樹枝狀大分子引到硅膠表面,可以大大增加硅膠的表面積、容量和選擇性。固定化酶具有穩(wěn)定性好、可重復(fù)并連續(xù)使用等優(yōu)點(diǎn),克服了游離酶對環(huán)境敏感、性質(zhì)不穩(wěn)定、易失活或死亡等缺點(diǎn)。聚酰胺-胺(PAMAM)作為一種性能優(yōu)良的樹枝狀大分子,可作為酶的固定化載體,利用其自身的特點(diǎn),提高單位面積內(nèi)固定化酶量。 本文采用發(fā)散
2、合成法,使用直徑50μm的硅膠,經(jīng)過氫氧化鈉、去離子水、鹽酸處理后,以3-氨丙基-三乙氧基硅烷(APTES)作為硅烷化試劑,通過丙烯酸甲酯與APTES的端氨基發(fā)生Micheal加成反應(yīng),得到0.5G的聚酰胺-胺(PAMAM),之后端酯基與乙二胺發(fā)生酰胺化反應(yīng),得到1.0G的枝形大分子PAMAM表面修飾的硅膠,重復(fù)以上過程,制得2.0G、3.0G樹枝狀大分子表面修飾的硅膠。采用氨基滴定、核磁共振、掃描電鏡、熒光顯微鏡和元素分析等手段對合成
3、產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)和性能進(jìn)行了表征,結(jié)果表明合成的樹枝狀大分子具有良好的性能。 使用戊二醛交聯(lián)氨基酰化酶與PAMAM,在戊二醛濃度為1%、交聯(lián)時間4h、交聯(lián)溫度25℃的條件下固定氨基?;?,固定后的氨基酰化酶擁有較高的活性;以1.0G-3.0G樹枝分子PAMAM分別與氨基酰化酶進(jìn)行交聯(lián),發(fā)現(xiàn)固定化酶的活性呈逐代遞增趨勢。研究了pH、Co2+濃度和底物濃度對固定化酶活性的影響,結(jié)果表明,固定化氨基?;傅淖罴逊磻?yīng)條件為pH7.5,溫度65
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