中性粒細胞在尿路感染中對樹突狀細胞的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、尿路感染(Urinary Tract Infections，UTIs)是臨床上泌尿系統(tǒng)的常見疾病，革蘭氏陰性桿菌(80％為大腸桿菌)是UTIs的主要致病菌，在由大腸桿菌所致的UTIs炎癥反應(yīng)中，Th1細胞因子起主要的作用，即機體對該種感染的免疫反應(yīng)主要是Th1適應(yīng)性免疫應(yīng)答。臨床上UTIs病人小便中白細胞計數(shù)(主要為中性粒細胞)往往顯著增高，提示中性粒細胞(Polymorphonuclear leucocyte，PMN)參與這一炎癥反應(yīng)

2、。在這類適應(yīng)性免疫應(yīng)答過程中，樹突狀細胞(Dendriticcells，DCs)以其捕獲抗原，向次級淋巴器官遷移，呈遞抗原和分泌白細胞介素12(Interleukin，IL-12)等細胞因子的功能發(fā)揮極其重要的作用。然而，作為固有免疫系統(tǒng)中的一員，能感染早期階段形成抵御外來病原菌入侵的第一道防線的PMN也被證實可參與適應(yīng)性免疫應(yīng)答，提示兩者之間有某種聯(lián)系。 鑒于目前在Th1適應(yīng)性免疫應(yīng)答過程中關(guān)于DCs如何活化并如何介導(dǎo)Th1分

3、化的細胞分子機制并沒有得到完善的闡述，本試驗在體外以脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)模擬大腸桿菌感染，研究PMN對DCs的調(diào)節(jié)作用，從而將固有和適應(yīng)性免疫過程聯(lián)系起來。(論文發(fā)表于ImmunologicalInvestigations及中華醫(yī)學(xué)雜志)目的探討Th1免疫應(yīng)答過程中，中性粒細胞對樹突狀細胞的調(diào)節(jié)作用，從而揭示固有和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的聯(lián)系。 材料和方法 將脂多糖刺激的中性粒細胞(LPS-PM

4、N)和未成熟樹突狀細胞共培養(yǎng)，流式細胞術(shù)檢測DCs表面CD40、CD80、MHC-Ⅱ(Iab)、和CD86水平，酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測白細胞介素12、腫瘤壞死因子α (Tumor necrosis factor，TNF-α)水平。將與LPS-PMN共培養(yǎng)后DCs(sPMN-DCs)提純，與FITC標(biāo)記的卵清蛋白(FITC-OVA)培養(yǎng)，檢測其吞噬功能。將sPMN-DCs與DO11.10T細胞和OVAl7肽共培養(yǎng)，計活細胞數(shù)，

5、胞內(nèi)染色測干擾素γ(Interferon，IFN-γ)、白細胞介素4(IL-4)水平。結(jié)果LPS-PMN可刺激imDCs CD40、CD80、MHC-Ⅱ(Lab)、和CD86上調(diào)并分泌IL-12、TNF-α，且這種能力能被抗TNF-α單抗所抑制。與imDCs對照，sPMN-DCs吞噬功能下降，能顯著刺激D011.10T細胞增殖，分泌高水平IFN-γ、少量IL-4。 結(jié)論 LPS-PMN具有促使imDCs成熟活化，刺激其分