煙草內生細菌多樣性分析及其對煙草黑脛病的防治作用研究.pdf

1、本研究在分析煙草內生細菌多樣性的基礎上,篩選出對煙草疫霉具有較好抑制作用的菌株,并測定拮抗菌株的生物學特性及其對煙草黑脛病的防治效果,取得的研究結果如下:
　　 1、從廣西百色市的12個煙草品種的48份標樣中分離出470株煙草內生細菌菌株,經(jīng)常規(guī)細菌鑒定方法和16s rDNA序列分析,獲得的菌株分別屬于腸桿菌屬(Enterobacter,)、沙雷氏菌屬(Serratia)、芽孢桿菌屬(Bacillus)、土壤桿菌屬(Agroba

2、cterium)、寡養(yǎng)單胞菌屬(Stenotrophomnas)和假單胞菌屬(Pseudomonas)。其中土壤桿菌屬和腸桿菌屬為煙草內生細菌中的優(yōu)勢種群。煙草內生細菌的類群隨煙草種植地點、品種、器官和生育期的不同而不同。
　　 2、煙草內生細菌種群數(shù)量隨煙草器官和生育期的不同而異。根的含菌量最高,其次為莖,時含菌量最低。不同生育期煙草內生細菌的數(shù)量呈現(xiàn)出從緩苗期到旺長期逐漸增加,從旺長期到成熟期下降的趨勢。
　　 3、

3、從470株煙草內生細菌菌株中篩選出對煙草疫霉有拮抗作用的菌株56株,其中菌株Y10的抑制效果最好,抑制率達91.48％,室內盆栽防治效果為68.72％。經(jīng)形態(tài)、生理生化測定和16S DNA序列分析,菌株Y10被鑒定為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)。該菌株生長最適pH為6.0-8.0,最適溫度為30℃,能利用乳糖、D-果糖、D-木糖、葡萄糖、甘露醇、蔗糖、麥芽糖、山梨醇、纖維二糖、D-半乳糖、可溶性淀粉等碳源和牛肉膏、

4、干酪素、酵母浸膏、大豆蛋白胨、硝酸鉀、硫酸銨、氯化銨等氮源,最適碳源和最適氮源分別為甘露醇和酵母浸膏。此外,該菌株具有較寬的抑菌譜,對許多病原真菌都有一定的抑制作用。
　　 4、菌株Y10能在煙草植株體內定殖,灌根接種處理后能從煙草的根、莖、葉組織中分離出菌株Y10。該菌株在煙草根組織中的數(shù)量為接種后1-5天增加,接種后5-30天逐漸減少。在煙草莖和葉組織中的數(shù)量為接種后1-20天增加,接種后20-30天逐漸減少.