紅景天苷激活PI3K-Akt-Nrf2信號通路對局灶性腦缺血大鼠的神經(jīng)保護作用.pdf

1、目的:
　　(1)研究紅景天苷對局灶性腦缺血大鼠的神經(jīng)保護作用;(2)研究抑制PI3K/Akt/Nrf2信號通路對紅景天苷神經(jīng)保護作用的影響，從分子生物學水平闡明紅景天苷神經(jīng)保護作用的部分機理。
　　方法:
　　(1)健康成年的雄性SD大鼠60只，隨機分為假手術(shù)組(Sham)、模型組(MCAO)和紅景天苷給藥組(MCAO+Sal)，制備大腦中動脈閉塞(MCAO)模型，再灌注1h后腹腔注射紅景天苷（50 mg/kg）或生

2、理鹽水，連續(xù)給藥6天。免疫熒光法檢測大鼠腦組織TUNEL陽性細胞的表達情況，Real-Time qPCR檢測NogoA、NgR的mRNA表達，Western Blot法檢測Bcl-2、Caspase-3、Cleaved Caspase-3、BDNF、NGF、NogoA、NgR、Nrf2和HO-1的蛋白表達。
　　(2)健康成年的雄性SD大鼠50只，隨機分為假手術(shù)組(Sham)、模型組(MCAO)、紅景天苷給藥組(MCAO+Sal)

3、、PI3K抑制模型組(MCAO+LY294002)和P13K抑制給藥組(MCAO+LY294002+Sal)。在腦立體定位儀的引導下，向大鼠左側(cè)側(cè)腦室局部注射PI3K抑制劑(LY294002)或含25％ DMSO的PBS溶液，30 min后制備MCAO模型，MCAO模型大鼠再灌注1h后腹腔注射紅景天苷(50mg/kg)或生理鹽水。24 h后取材，Real-TimeqPCR檢測TNFα、IL-6和IL-1β的mRNA表達，Western

4、Blot法檢測p-IκBα、IκBα、p65、p-Akt、Akt、Nrf2、HO-1、Bcl-xl和Bax的蛋白表達。
　　結(jié)果:
　　(1)紅景天苷能夠減少MCAO大鼠腦組織細胞凋亡，促進MCAO大鼠Bcl-2、BDNF和NGF的蛋白表達，抑制MCAO大鼠Cleaved Caspase-3的蛋白表達，降低MCAO大鼠NogoA和NgR的mRNA和蛋白表達;同時，紅景天苷可促進MCAO大鼠腦組織Nrf2和HO-1的蛋白表達;

5、
　　(2)紅景天苷能夠降低MCAO大鼠腦組織p-Iκ Bα的蛋白表達和p65的核轉(zhuǎn)錄水平;紅景天苷促進了MCAO大鼠腦組織p-Akt、Nrf2和HO-1的蛋白表達并會被LY294002逆轉(zhuǎn);紅景天苷降低了MCAO大鼠腦組織TNFα、IL-6和IL-1β的mRNA表達并被LY294002逆轉(zhuǎn);紅景天苷促進Bcl-xl的蛋白表達并抑制Bax的蛋白表達，二者都會被LY294002逆轉(zhuǎn)。
　　結(jié)論:
　　紅景天苷可減少MCA