LED紅光對(duì)高脂血癥大鼠血脂的影響及其機(jī)制探討.pdf

1、目的：心腦血管疾病已經(jīng)成為危害人類健康的主要疾病之一，居于我國(guó)死亡原因的首位。心腦血管疾病的發(fā)生與脂代謝異常密切相關(guān)，適當(dāng)?shù)恼{(diào)脂治療能夠顯著改善心腦血管疾病的預(yù)后，如何安全有效的調(diào)節(jié)血脂成為臨床研究的熱點(diǎn)。目前，調(diào)脂的方法主要包括兩大類：非藥物治療和藥物治療。非藥物治療主要是通過(guò)改變生活方式(低脂飲食、運(yùn)動(dòng)鍛煉、減肥、戒煙)來(lái)調(diào)節(jié)血脂，適用于輕度血脂異?；颊?，當(dāng)非藥物治療3-6個(gè)月不能奏效的時(shí)候，需要應(yīng)用藥物來(lái)調(diào)節(jié)血脂。目前國(guó)內(nèi)外常用的

2、有5類：他汀類、貝特類、煙酸類、樹脂類(膽酸螯合劑)和膽固醇吸收抑制劑。臨床上以他汀類和貝特類較為常用，然而隨著藥物劑量的增加，其不良反應(yīng)如轉(zhuǎn)氨酶升高，肌痛及橫紋肌溶解等發(fā)生率也顯著上升。近年來(lái)物理治療以其安全確切的療效在臨床中得到廣泛應(yīng)用，其在血脂領(lǐng)域的研究和應(yīng)用也備受關(guān)注。
　　研究表明低強(qiáng)度激光照射療可以降低血脂含量，改善血液流變學(xué)。LED紅光與低強(qiáng)度激光的波長(zhǎng)范圍相似，且具有功耗低，易集成等特點(diǎn)，我科小樣本初步臨床試驗(yàn)顯示

3、LED紅光在調(diào)節(jié)血脂方面有一定的作用。為此，我們?cè)诔晒⒋笫蟾咧Y模型的基礎(chǔ)上，用LED紅光治療儀(波長(zhǎng)630nm±15nm，亮度≥8000cd/m2)照射大鼠腹部，測(cè)定大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C的含量及血漿LPL、HP的活性，肝臟病理切片HE染色、肝臟HMG-CoA還原酶免疫組化染色，觀察LED紅光對(duì)高脂血癥大鼠血脂、肝臟病理學(xué)改變和HMG-CoA還原酶表達(dá)的影響。
　　方法：36只雄性SD大鼠，8周齡，體重

4、218-287g，隨機(jī)分為正常對(duì)照組(12只)和高脂模型組(24只)。正常對(duì)照組喂飼普通飼料，高脂模型組喂飼高脂飼料，連續(xù)喂養(yǎng)6周。大鼠禁食12小時(shí)，內(nèi)眥靜脈叢采血，測(cè)定血清TC、TG的含量，高脂模型組大鼠血清TC、TG的含量高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即為造模成功。隨后，將高脂模型組大鼠隨機(jī)分為高脂對(duì)照組和LED治療組，LED治療組給予LED紅光照射每天30分鐘，高脂對(duì)照組不給予照射，連續(xù)28天，照射期間各組喂養(yǎng)飼料不變。分別于

5、照射的第14天、第28天，大鼠禁食過(guò)夜，次日內(nèi)眥靜脈叢采血，測(cè)定大鼠血漿中TC、TG、LDL-C、HDL-C的含量。于照射第28天取血后大鼠尾靜脈注射肝素130u/kg，測(cè)定LPL、HL的活性。之后處死大鼠，稱大鼠肝臟濕重，取肝右葉中部小塊組織，4%多聚甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋、切片、HE染色，HMG-CoA還原酶免疫組化染色，光鏡下觀察肝臟病理改變及肝臟HMG-CoA還原酶的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.高脂飲食對(duì)大鼠血清TC

6、、TG、LDL-C、HDL-C的影響：經(jīng)過(guò)6周的高脂飼料喂養(yǎng)，與正常對(duì)照組比較，高脂模型組大鼠血清TC、TG、LDL-C的含量明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，說(shuō)明高脂模型造模成功。
　　2.LED紅光對(duì)高脂血癥大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C的影響：LED照射前，LED治療組與高脂對(duì)照組相比，血清TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量均無(wú)明顯差異。LED照射14天后，LED治療組與高脂對(duì)照組相比，血清TC、

7、TG、LDL-C的含量降低，HDL-C的含量升高，但只有LDL-C有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。LED照射28天后，LED治療組與高脂對(duì)照組相比，血清TC、TG、LDL-C的含量降低，HDL-C的含量升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　3.LED紅光對(duì)高脂血癥大鼠血漿LPL、HL活性的影響：LED紅光照射28天后，LED治療組大鼠血漿LPL、HL的活性高于高脂對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　4.LE

8、D紅光對(duì)大鼠體重、肝重、肝指數(shù)的影響：實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，LED治療組與高脂對(duì)照組相比，其肝重、肝指數(shù)都明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。LED治療組大鼠體重與高脂對(duì)照組相比，也有所降低，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　5.大鼠肝臟病理改變：肉眼觀察：正常對(duì)照組肝臟呈紅褐色，質(zhì)地中等，包膜光滑，邊緣銳利，切面光潔。高脂對(duì)照組肝臟呈黃白色，質(zhì)地偏硬，包膜緊張，邊緣圓鈍，切面油膩。LED治療組肝臟色澤、質(zhì)地較高脂對(duì)照組有不

9、同程度的改善。
　　光鏡觀察：正常對(duì)照組肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，肝細(xì)胞排列整齊，細(xì)胞核形態(tài)正常，胞漿均勻；高脂對(duì)照組肝細(xì)胞胞漿內(nèi)充滿大小不等的脂肪滴，細(xì)胞核多被擠向一邊，肝細(xì)胞排列紊亂；LED治療組脂肪空泡的數(shù)量與高脂對(duì)照組相比明顯減少，細(xì)胞核基本居于細(xì)胞的中央，肝細(xì)胞排列較高脂對(duì)照組有序。
　　6.肝臟HMG-CoA還原酶的表達(dá)：HMG-CoA還原酶陽(yáng)性部位在肝細(xì)胞胞漿內(nèi)，呈棕黃色。正常對(duì)照組大鼠肝臟中央靜脈及匯管區(qū)周圍可見散在分

10、布的陽(yáng)性細(xì)胞，免疫組化評(píng)分(1.9±0.99)，高脂對(duì)照組大鼠肝臟中央靜脈及匯管區(qū)周圍可見較多陽(yáng)性細(xì)胞，免疫組化評(píng)分(3.8±1.99)顯著高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。LED治療組大鼠肝臟可見少量陽(yáng)性細(xì)胞，與高脂對(duì)照組相比，陽(yáng)性細(xì)胞的個(gè)數(shù)明顯降低，免疫組化評(píng)分(2.1±1.29)低于高脂對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.本研究采用高脂飲食誘導(dǎo)法，成功復(fù)制了大鼠高脂血癥模型。