植物甾醇酯的酶促合成及其對高脂血癥大鼠血脂代謝的影響.pdf

1、植物甾醇是一類存在于植物體內(nèi)的天然生物活性成分，主要通過抑制膳食和膽汁中的膽固醇在腸道內(nèi)的吸收從而達到降膽固醇的效果，由于游離的植物甾醇在水和油脂中的低溶解性，限制了其實際應(yīng)用范圍。研究發(fā)現(xiàn)酯化后的植物甾醇酯，可大大增加植物甾醇的溶解性，能比較方便地添加到油脂類食品中。目前，植物甾醇酯的合成主要有化學(xué)法和酶法，與化學(xué)法相比，酶法具有反應(yīng)條件溫和，高效專一，副反應(yīng)較少，產(chǎn)物質(zhì)量好并易于純化分離等優(yōu)勢。本文選擇酶法催化合成植物甾醇酯，改進植

2、物甾醇酯的分離提純方法，獲得高純度產(chǎn)品；以不同植物甾醇酯產(chǎn)品，進行等劑量高脂血癥大鼠的血脂代謝影響研究，探索植物甾醇酯降低高脂血癥的作用效果。主要研究結(jié)果如下：
　　(1)研究了脂肪酶催化植物甾醇和油酸反應(yīng)合成植物甾醇油酸酯。運用中心組合設(shè)計，以酯化率為考察指標(biāo)，對脂肪酶Candida rugosa催化合成植物甾醇油酸酯進行了優(yōu)化研究。通過甾醇酯化率的響應(yīng)面分析，研究了反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間、底物摩爾比(油酸：植物甾醇)和加酶量及其交

3、互作用對酯化反應(yīng)的影響，構(gòu)建了相應(yīng)的回歸模型，并進行了驗證，結(jié)果表明：反應(yīng)溫度41℃，反應(yīng)時間19h，底物摩爾比2.4:1，加酶量7%為最佳條件，酯化率可達77.43%。
　　(2)采用薄層色譜法(TLC)、紫外光譜法(UV-VIS)、紅外光譜法(FT-IR)和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)，對甾醇酯進行了有效的檢測分析及結(jié)構(gòu)表征。TLC、UV-VIS、FT-IR法可以判斷反應(yīng)產(chǎn)物中基本不含甾醇，形成酯鍵。GC-MC檢測分析證

4、明反應(yīng)產(chǎn)物主要為β-谷甾醇酯、豆甾醇酯、菜油甾醇酯以及少量的菜籽甾醇酯；進而對產(chǎn)物進行分離提純，經(jīng)GC檢測甾醇酯純度達91.2%。
　　(3)以植物甾醇油酸酯和亞油酸酯對高脂血癥大鼠的血脂代謝影響進行研究。在建立高脂血癥大鼠模型基礎(chǔ)上，分組給予高/低劑量的兩種甾醇酯，干預(yù)6周后，測定結(jié)果表明，兩種甾醇酯均具有降血脂作用，能顯著降低大鼠血清總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和載脂蛋白ApoB，升高高密度脂蛋白膽固醇(