共軛亞油酸β-谷甾醇酯的酶催化合成及其功能性質(zhì)的研究.pdf

1、植物甾醇酯可以降低人體血液膽固醇的水平，已經(jīng)作為功能性成分應(yīng)用到食品生產(chǎn)中。本文以植物甾醇中存在最廣泛的β-谷甾醇為原料，合成共軛亞油酸β-谷甾醇酯(CLS)并研究了其功能性質(zhì)。 確定了CLS的薄層層析(TLC)條件：反應(yīng)液3μL，在環(huán)己烷/無(wú)水乙醚(19∶1，v/v)混合溶劑中展開(kāi)，用5％的硫酸乙醇溶液噴霧，在120℃烘箱中顯色15min。將TLC條件應(yīng)用到硅膠柱層析分離純化β-谷甾醇酯，條件為：反應(yīng)液5mL上硅膠層析柱，流動(dòng)

2、相為環(huán)己烷/無(wú)水乙醚(19∶1，v/v)，流速為15mL/h，收集洗脫液，并用TLC檢測(cè)產(chǎn)物。分離純化的CLS采用大氣壓化學(xué)電離質(zhì)譜進(jìn)行鑒定。 采用高效液相色譜(HPLC)測(cè)定酯化率，優(yōu)化了有機(jī)相脂肪酶催化合成CLS的生產(chǎn)工藝：在正己烷介質(zhì)中，β-谷甾醇濃度為0.05mmol/mL，酸醇摩爾比為1∶1，4A分子篩用量為60mg/mL，酶用量為20mg/mL，在50℃恒溫水浴振蕩器中連續(xù)反應(yīng)72h，反應(yīng)酯化率可達(dá)72.63％。

3、 CLS的脂溶性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：CLS在花生油中的溶解度為45.24％，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于β-谷甾醇在花生油中的溶解度1.13％。 研究了CLS對(duì)共軛亞油酸(CLA)、花生四烯酸(AA)和二十二碳六烯酸(DHA)的抗氧化作用。結(jié)果表明：在CLA、AA和DHA中加入β-谷甾醇和β-谷甾醇酯，貯藏一定時(shí)間后，其POV都比相應(yīng)的空白值低，說(shuō)明二者都具有一定的抗氧化作用，但是β-谷甾醇酯的抗氧化性明顯優(yōu)于β-谷甾醇，且二者的抗氧化效果與其添加量