植物乳桿菌轉(zhuǎn)化亞油酸生成共軛亞油酸的研究.pdf

1、本課題對(duì)Lactobacillusplantarum轉(zhuǎn)化亞油酸生成CLA過(guò)程進(jìn)行了研究，內(nèi)容包括菌種分離、篩選、鑒定，菌種誘變選育，CLA發(fā)酵過(guò)程動(dòng)力學(xué)，洗滌細(xì)胞轉(zhuǎn)化亞油酸生成CLA，亞油酸異構(gòu)酶分離純化，酶學(xué)性質(zhì)研究和提高發(fā)酵牛乳CLA含量實(shí)驗(yàn)研究。論文主要內(nèi)容如下： 1)從酸菜中分離出一株較高CLA產(chǎn)量的乳酸菌L29，鑒定為植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum置信度96.1％)。 2)以L.pla

2、ntarumL29為出發(fā)菌株，通過(guò)紫外線照射和硫酸二乙酯(DES)誘變處理，選育出突變株L.plantarumLT2-6，CLA產(chǎn)量提高18.6％。 3)對(duì)L.plantarumLT2-6在5L罐規(guī)模的分批發(fā)酵過(guò)程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)分析研究，獲得了分批發(fā)酵過(guò)程動(dòng)力學(xué)曲線，建立了分批發(fā)酵過(guò)程菌體生長(zhǎng)、產(chǎn)物CLA生成和底物(葡萄糖)代謝數(shù)學(xué)模型。 4)L.plantarumLT2-6洗滌細(xì)胞轉(zhuǎn)化亞油酸生成CLA優(yōu)化條件為：30℃，p

3、H7.0，亞油酸濃度1.5％(w/v)，細(xì)胞濃度20％(w/v)。反應(yīng)64h，CLA產(chǎn)量達(dá)到最大(7.86g/L)，亞油酸轉(zhuǎn)化率為52.4％。經(jīng)脂肪酸萃取和甲酯化，氣相色譜檢測(cè)顯示，主要產(chǎn)物為cis-,trans-9,11-CLA。 5)L.plantarumLT2-6亞油酸異構(gòu)酶分子量約為48.8KDa，最適pH6.0，最適溫度30℃，不耐熱，溫度高于50℃時(shí)，穩(wěn)定性下降很快。金屬離子對(duì)此酶活力影響順序?yàn)椋篗g2+＞Ca2+＞