維生素A過量對肉雞鈣、磷沉積及堿性磷酸酶和骨鈣素表達(dá)的影響.pdf

1、本論文共分4個試驗(yàn)研究了維生素A過量對肉雞鈣、磷沉積及堿性磷酸和骨鈣素基因表達(dá)的影響。試驗(yàn)1～試驗(yàn)3利用體內(nèi)法，采用單因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計，將1日齡健康愛拔益加(AA)肉雞(公母各半H50只，隨機(jī)分為5個日糧處理組，每個處理組6個重復(fù)，每個重復(fù)組15只雞，試驗(yàn)期42天。以玉米和豆粕為主要原料配制基礎(chǔ)日糧(基礎(chǔ)日糧中不添加維生素A)，5種試驗(yàn)日糧分別是在基礎(chǔ)日糧中添加：3000、6000、15000、30000和60000 IU/kg的維

2、生索A配制而成。試驗(yàn)1通過研究過量維生素A對肉雞血清鈣、磷及脛骨鈣、磷含量、脛骨BMD及脛骨灰分的影響，進(jìn)一步驗(yàn)證過量維生素A對肉雞鈣、磷沉積的影響。試驗(yàn)2主要通過研究維生素A過量對肉雞鈣、磷沉積相關(guān)激素及骨形成標(biāo)志物的影響，探討了維生素A過量對肉雞鈣、磷沉積的影響機(jī)制。試驗(yàn)3主要通過研究維生素A過量對肉雞脛骨、肝臟及小腸組織中ALP mRNA和BGP mRNA相對表達(dá)量的影響，探討了過量維生索A對肉雞鈣、磷沉積影響的分子機(jī)理，試驗(yàn)4利

3、用體外細(xì)胞培養(yǎng)法，研究了不同濃度維生素A(0，0.03，0.10，0.30，1.00，2.00，6.00，12．00，24.00μg/ml對肉雞顱骨成骨細(xì)胞分泌功能及ALP,RNA和BGPmRNA相對表達(dá)量的影響，從成骨細(xì)胞活性的角度在細(xì)胞水平和分子水平上進(jìn)一步探討了維生素A過量對肉雞鈣、磷沉積的影響機(jī)制。
　　 在本研究的試驗(yàn)條件下初步得出以下結(jié)果：
　　 ①肉雞脛骨鈣、磷沉積和脛骨強(qiáng)度與日糧維生素A水平呈顯著或趨于顯

4、著的劑量依賴關(guān)系(P<0.05；P<0.10]。其中，脛骨鈣磷沉積與脛骨強(qiáng)度以3000- 6000 IU／kg維生素A組較高：30000~60000IU／kg維生素A組較低；日糧維生素A水平為15000IU／kg時，脛骨鈣、磷沉積與脛骨強(qiáng)度也呈一定降低趨勢。
　　 ②日糧維生素A水平在3000-60000IU／kg范圍內(nèi)，日糧維生素A水平以劑量依賴模式影響肉雞的血清PTH、CT、1，25(OH)2D3、BOP與PINP濃度及血清

5、ALP和BAP活性(P<0．05;P<0.10]。其中，30000-6000 IU/kg的高劑量維生素A引起肉雞血清中PTH濃度升高，CT與1，25(OH)2D3濃度及BGP與PINP濃度降低，ALP與BAP活性降低。
　　 ③隨日糧維生素A添加劑量的升高，肉雞脛骨、肝臟及小腸組織中ALPmRNA和BGP mRNA相對表達(dá)量均呈不同程度降低，二者呈顯著(P<0.05)或趨于顯著(P>0.10)的一次線性或二次曲線劑量依賴關(guān)系：其

6、表達(dá)量均以3000-6000 IU/kg維生素A日糧組較高，30000-60000 IU/kg維生索A日糧組較低，15000IU/kg維生素A日糧組居中。提示日糧維生素A過量可下調(diào)肉雞脛骨和肝臟及小腸組織中ALPmRNA和。BGP mRNA的相對表達(dá)量。
　　 ④隨培養(yǎng)液中維生素A水平的增加，肉雞成骨細(xì)胞培養(yǎng)液中ALP活性、BGP、PINP、OPN和OPG濃度呈顯著的一次線性降低(P<0.05)或二次曲線降低趨勢(P<0.10)

7、。提示維生素A水平以劑量依賴模式影響肉雞成骨細(xì)胞的功能和活性，適宜的維生素A水平可促進(jìn)成骨細(xì)胞的活性，誘導(dǎo)其分化成熟，但高劑量的維生素A抑制成骨細(xì)胞的活性和分化成熟。
　　 ⑤隨培養(yǎng)液中維生素A水平的增加，成骨細(xì)胞ALPmRNA相對表達(dá)量呈顯著的一次線性或一元二次降低(P<0．05)，BGP mRNA相對表達(dá)量呈一元二次降低趨勢(P<0.10)。提示維生素A以劑量依賴模式影響成骨細(xì)胞ALP mRNA與BOP mRNA相對表達(dá)量，