過量維生素A對肉仔雞骨骼鈣磷代謝影響及機(jī)理的研究.pdf

1、本文共分5個試驗(yàn)研究了日糧VA過量對肉仔雞鈣磷代謝的影響及機(jī)制。試驗(yàn)1～試驗(yàn)4利用體內(nèi)法，采用單因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將1日齡健康A(chǔ)A雄性肉仔雞1 92只，隨機(jī)分成4個處理組，每處理組設(shè)6個重復(fù)，每個重復(fù)8只，試驗(yàn)期42d。以玉米和豆粕為主要原料配制試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧，分別在基礎(chǔ)日糧中添加4個不同水平的V<,A>(1500、3000、15000和45000 IU/kg)構(gòu)成4個日糧處理組，分別研究了過量V<,A>對肉仔雞生長性能與組織V<,A

2、>、V<,E>代謝，骨骼發(fā)育和鈣、磷沉積的影響；研究了過量V<,A>對與鈣磷代謝相關(guān)激素、活性因子和酶活的影響：利用RT-PCR技術(shù)研究了過量V<,A>對CaBP基因相對表達(dá)量的影響。試驗(yàn)5以含有20％胎牛血清的DMEM/F-12作為基礎(chǔ)培養(yǎng)液，添加不同水平V<,A>(0.0μg/ml、0.2μg/ml、0.6μg/ml、1.0μg/ml、2.0μg/ml、5.0μg/ml、10.0μg/ml、20.0μg/ml)構(gòu)成8個處理組，每處理

3、6個重復(fù)，連續(xù)培養(yǎng)48h。利用體外細(xì)胞培養(yǎng)法研究了過量VA對肉仔雞成骨細(xì)胞鈣磷代謝及CaBP基因表達(dá)的影響。 在本研究的試驗(yàn)條件下初步得出以下結(jié)果： 1、日糧V<,A>水平為15000、45000 IU/kg時，可引起肉仔雞生長后期的生長速度顯著下降，生長全期也有明顯的下降趨勢；肝臟、腎臟V<,A>含量顯著上升，而血清、肝臟與腎臟的V<,E>含量均顯著降低；日糧V<,A>水平為45000 IU/kg時，引起血清V<,A>

4、含量的顯著上升。 2、日糧V<,A>過量對肉仔雞骨骼發(fā)育及骨骼強(qiáng)度有顯著的影響，日糧V<,A>水平為45000 IU/kg時，脛骨重量、骨密度及脛骨鈣含量顯著降低，脛骨長度、脛骨灰分有明顯的降低趨勢，提示脛骨強(qiáng)度顯著降低。日糧V<,A>水平為15000IU/kg時，上述各指標(biāo)呈不同程度降低趨勢。 3、利用體內(nèi)法從分子水平及組織代謝層次研究了過量V<,A>對肉仔雞骨骼鈣磷代謝影響的部分機(jī)制。主要表現(xiàn)在：過量V<,A>引起血

5、清CaBP含量下降，小腸與脛骨組織CaBP基因表達(dá)量降低；過量V<,A>導(dǎo)致血清BGP含量與AKP活性降低；過量V<,A>引起與鈣磷代謝有關(guān)的激素含量發(fā)生改變，PTH含量增加，CT與V<,D3>含量降低。 4、利用體外法進(jìn)一步從細(xì)胞水平、分子水平研究了過量V<,A>對肉仔雞骨骼鈣磷代謝影響的機(jī)制，結(jié)果表明過量V<,A>引起成骨細(xì)胞活性降低，體外培養(yǎng)液中BGP含量與AKP活性下降：V<,A>過量對成骨細(xì)胞的CaBP合成及CaBP基

6、因表達(dá)量也有一定的抑制作用。 5、從肉仔雞生長性能、V<,A>與V<,E>代謝、骨骼強(qiáng)度與鈣磷沉積及鈣磷代謝的角度考慮，日糧V<,A>水平為3000 IU/kg可滿足肉仔雞的V<,A>營養(yǎng)需要；日糧V<,A>水平為15000 IU/kg時，提示肉仔雞V<,A>臨界過量；日糧V<,A>水平為45000IU/kg時，提示肉仔雞V<,A>過量。 6、脛骨骨密度、鈣濃度及脛骨重量可較好地反映肉仔雞骨骼強(qiáng)度與鈣磷沉積的變化：脛骨長