廣西生何首烏天然小分子化合物的提取分離及抗腫瘤活性篩選.pdf

1、目的：應(yīng)用經(jīng)典的提取分離方法從廣西生何首烏中提取分離小分子天然化合物，并對其進行抑制卵巢癌細胞生長活性的篩選。
　　 方法：(1)利用系統(tǒng)溶劑萃取法、重結(jié)晶法、硅膠柱色譜、聚酰胺柱色譜、SephadexLH-20柱色譜等分離手段對生何首烏水提取物及乙酸乙酯回流物進行了分離，并通過理化性質(zhì)和波譜分析鑒定所獲得的小分子化合物的結(jié)構(gòu)。(2)通過MTT法檢測小分子化合物對卵巢癌SKOV-3細胞的生長抑制率，確定藥物的抑制活性：(3)通過

2、HE染色實驗觀察小分子化合物對SKOV-3的細胞的形態(tài)學(xué)改變和對細胞增殖的影響；(4)通過AnnexinV-FITC凋亡試劑盒，檢測小分子化合物是否具有誘導(dǎo)SKOV-3細胞凋亡作用；(5)將沒食子酸分別與順鉑和丁酸鈉聯(lián)用，MTT法測定其是否具有協(xié)同作用。
　　 結(jié)果：(1)從生首烏水提取物及乙酸乙酯回流物分離獲得9個化合物，其4個經(jīng)波譜分析鑒定，分別是大黃素、表兒茶素、二苯乙烯苷、沒食子酸。(2)MTT實驗結(jié)果表明沒食子酸對SK

3、OV-3細胞的抑制作用最強，其IC50為23.4μg·ml-1。(3)HE染色發(fā)現(xiàn)IC50濃度的大黃素、表兒茶素、沒食子酸能抑制SKOV-3細胞增殖，細胞胞質(zhì)濃縮、深染。(4)在熒光倒置顯微鏡下觀察到IC50濃度的表兒茶素、沒食子酸能誘導(dǎo)SKOV-3細胞凋亡。(5)無細胞毒作用的濃度8.5μg·ml-1的沒食子酸與低于IC50濃度的順鉑聯(lián)用，能協(xié)同抑制卵巢癌細胞株SKOV-3的增殖；而與丁酸鈉聯(lián)用只能起到簡單加和作用。
　　 結(jié)