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1、目的:通過應(yīng)用電化學(xué)方法對(duì)人體內(nèi)乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)、黑色素瘤細(xì)胞(B16)以及小鼠成纖維細(xì)胞(3T3)進(jìn)行研究,考察了不同分泌時(shí)間對(duì)三種細(xì)胞電化學(xué)信號(hào)的影響,建立一種能夠區(qū)分正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的電化學(xué)方法。在三種細(xì)胞的裂解液中分別加入黃嘌呤氧化酶(XOD),采用電化學(xué)方法對(duì)細(xì)胞中的四種嘌呤:腺嘌呤(A)、鳥嘌呤(G)、黃嘌呤(X)和次黃嘌呤(H)含量進(jìn)行測(cè)定。
方法:選取細(xì)胞3T3、MCF-7、B16作為模型細(xì)胞,采用電
2、化學(xué)循環(huán)伏安法對(duì)三種細(xì)胞進(jìn)行電化學(xué)測(cè)試,采用高效液相色譜法(HPLC)對(duì)三種細(xì)胞的電化學(xué)循環(huán)伏安曲線進(jìn)行歸屬;并應(yīng)用電化學(xué)方法檢測(cè)不同分泌時(shí)間三種細(xì)胞電化學(xué)信號(hào)的變化情況,同時(shí)對(duì)三種細(xì)胞中腺嘌呤、鳥嘌呤、黃嘌呤和次黃嘌呤的含量進(jìn)行測(cè)定。
結(jié)果:在細(xì)胞分泌實(shí)驗(yàn)中,3T3細(xì)胞在分泌60分鐘時(shí),電化學(xué)信號(hào)PeakⅠ和PeakⅡ達(dá)到最大值;MCF-7細(xì)胞在分泌40分鐘時(shí),電化學(xué)信號(hào)PeakⅠ和PeakⅡ達(dá)到最大值;B16細(xì)胞在分泌50
3、分鐘時(shí),電化學(xué)信號(hào)PeakⅠ和PeakⅡ達(dá)到最大值。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以得出:腫瘤細(xì)胞的分泌能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于正常細(xì)胞。在對(duì)3T3、MCF-7以及B16細(xì)胞中四種嘌呤含量的定量分析試驗(yàn)中,加入黃嘌呤氧化酶后,三種細(xì)胞的電化學(xué)信號(hào)PeakⅠ和PeakⅡ均減小了,并產(chǎn)生了尿酸峰。通過對(duì)PeakⅠ和PeakⅡ原有的量和減少的量進(jìn)行減法計(jì)算,既得三種細(xì)胞中四種嘌呤的含量。
結(jié)論:采用電化學(xué)法考察不同分泌時(shí)間對(duì)三種細(xì)胞電化學(xué)信號(hào)的變化,建立電化學(xué)方
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