電化學(xué)治療對人乳腺癌MCF-7細胞系的作用機制的實驗研究.pdf

1、目的：本實驗通過檢測電化學(xué)治療前后乳腺癌細胞培養(yǎng)液PH值的變化、乳腺癌細胞凋亡和生長情況、細胞周期變化、細胞內(nèi)鈣離子的變化、c-myc和cyclin E表達變化，進一步探討電化學(xué)療法對人乳腺癌細胞周期時相的影響及其抑制細胞生長誘導(dǎo)凋亡的部分機制。
　　方法：用不同電量處理MCF-7細胞繼續(xù)培養(yǎng)6小時和24小時后通過酸度計、MTT法、GENMED細胞鈣離子濃度比色法、流式細胞儀、激光共聚焦和免疫組化法分別檢測細胞培養(yǎng)液PH值、細胞抑

2、制率、細胞內(nèi)Ca2+濃度、細胞周期、觀察凋亡和壞死情況及c-myc和cyclin E表達的變化。
　　結(jié)果：電化學(xué)作用后與空白對照組相比，陰極 PH值明顯升高，呈堿性；陽極 PH值明顯下降，呈酸性，統(tǒng)計學(xué)均有顯著性差異，（P<0.05﹚。各組電化學(xué)劑量治療后，陰極處pH值相互比較差異有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05），陽極處各電化學(xué)劑量間pH值改變幅度有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）。其中以20 C組PH值變化幅度最大。
　　與對照組

3、相比，治療組人乳腺癌 MCF-7細胞抑制率均隨電量增加依次增高(P<0．05)。
　　干預(yù)組與對照組相比細胞內(nèi)Ca2+濃度隨電量的增加而增加，呈明顯的量效關(guān)系，且24小時比6小時增加更明顯隨時間增加而升高，表明ECT可使人乳腺癌細胞MCF-7細胞內(nèi)Ca2+濃度升高，在一定電量范圍內(nèi)細胞內(nèi)Ca2+濃度與凋亡率呈正相關(guān)。
　　治療組隨電量的增加處于 G0/G1期的比例逐漸增高，而S期細胞比例逐漸下降(P<0．05)，G2/M期變

4、化不明顯(P>0．05)。
　　細胞凋亡率在3、5、10C(C為電量庫侖)明顯依次增高，而20C增高不明顯(P<0．05)，壞死率與對照組相比均呈明顯依次增高(P<0．05)，24小時比6小時增加明顯(P<0．05)。治療組c-myc和cyclin E表達隨電量的增加陽性細胞數(shù)逐漸減少。
　　電化學(xué)治療后培養(yǎng)24h比6h各組指標變化顯著。
　　結(jié)論：低毫安電化學(xué)療法通過改變?nèi)巳橄侔┘毎鸐CF-7生存環(huán)境PH值及人乳腺癌