鹽酸小檗堿對人乳腺癌MCF-7細胞裸鼠移植瘤的作用研究.pdf

1、背景:
　　乳腺癌是一種女性常見的惡性腫瘤，嚴重影響身心健康甚至危害生命，其在女性癌癥發(fā)病率中位居第一。乳腺癌的治療主要以手術為主，并且配合術后化療、靶向治療等綜合療法，但放、化療過程中的不良反應以及多藥物耐藥現(xiàn)象所導致的治療失敗仍是臨床需進一步解決的問題。因此，尋找有效、低毒、天然、副作用小的中藥治療乳腺癌及其相關的研究已成為一個緊迫的問題。
　　小檗堿又名黃連素，是一種常見的異喹啉類生物堿，從黃蓮、黃柏等中草藥中提取獲得

2、，具有抗病原微生物和抗菌的功效。小檗堿可以通過促進腫瘤細胞凋亡、抑制腫瘤細胞增殖、抑制腫瘤細胞轉移以及增強腫瘤細胞對化療藥物的敏感性等方式起一定的抗腫瘤作用。
　　小檗堿與乳腺癌之間的關系是目前的研究熱點，體內(nèi)研究尚未見報道。因此，本課題希望通過將人乳腺癌細胞MCF-7接種于裸鼠皮下，建立裸鼠乳腺癌動物模型，研究鹽酸小檗堿對MCF-7乳腺癌小鼠體內(nèi)產(chǎn)生的作用與影響。
　　目的:
　　本課題通過將人乳腺癌細胞系MCF-7

3、接種于裸鼠背部皮下，建立乳腺癌動物模型，研究鹽酸小檗堿對MCF-7乳腺癌小鼠體內(nèi)產(chǎn)生的作用與影響。
　　方法:
　　一、在小鼠右背部皮下接種細胞，建立人乳腺癌MCF-7移植瘤裸鼠模型，計算出藥物的抑瘤療效(TGI)。
　　二、應用HE染色法檢測各實驗組的裸鼠移植瘤組織的染色情況。
　　三、應用TUNEL染色法檢測各實驗組的裸鼠移植瘤組織的細胞凋亡情況。
　　四、應用流式細胞儀檢測各實驗組的裸鼠移植瘤組織的細

4、胞周期情況。
　　五、應用免疫組化SP法、Western blot檢測各實驗組的裸鼠移植瘤組織的MMP-2、MMP-9、p53、EGFR蛋白的表達情況。
　　結果:
　　1、裸鼠移植瘤生長情況:(1)每組大鼠在第21天時的體重均比第1天有所下降，各組具有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。(2)五組裸鼠的體積差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　2、各藥物組的腫瘤抑制率:B1、B2、B3、C組的TGI值分別是5.55％

5、、4.91％、58.88％、67.72％，差異均有顯著性差異(P＜0.01)。
　　3、裸鼠移植瘤組織病理學變化:(1)肉眼:移植瘤呈圓形、類圓形或分葉狀生長。(2)光鏡:腫瘤細胞略增大，治療組異型細胞減少，瘤組織結構破壞。
　　4、TUNEL染色結果顯示:各組間細胞凋亡指數(shù)比較有統(tǒng)計學差異(p＜0.01)。
　　5、流式細胞術結果顯示:(1)S期所占細胞周期分布經(jīng)方差分析顯示:各組間比較均有顯著性差異(P＜0.01)

6、;(2)G0/G1期所占細胞周期分布經(jīng)方差分析顯示:各組間比較均有顯著性差異(P＜0.01)。
　　6、免疫組化、Western blot結果顯示:MMP-2、MMP-9、P53、EGFR蛋白在對照組中的表達量顯著高于其他實驗組，其組間差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　結論:
　　1.成功建立了裸鼠人乳腺癌MCF-7細胞皮下移植瘤疾病模型。
　　2.小檗堿能夠抑制MCF-7乳腺癌裸鼠腫瘤生長，抑制作用呈濃度