雌馬酚對人乳腺癌細胞MCF-7增殖的抑制作用及其機制研究.pdf

1、目的：觀察雌馬酚對人乳腺癌細胞MCF-7增殖的抑制作用，并探討其分子機制。
　　方法：用不同濃度雌馬酚(10-7mol/L、5×10-7mol/L、10-6mol/L、5×10-6mol/L、10-5mol/L)和雌二醇(10-9mol/L)分別處理人乳腺癌細胞MCF-7和人正常乳腺細胞MCF-10A，并用顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化、MTT法測定細胞數(shù)量和增殖率、流式細胞儀測定細胞凋亡率和周期、體外劃痕實驗測定細胞遷移能力、蛋白質(zhì)免疫

2、印跡技術(shù)檢測（bag-1、bcl-2、VEGF、ERK1/2、磷酸化ERK1/2、p38、磷酸化p38）蛋白的表達水平，從分子水平上了解雌馬酚對MCF-7細胞增殖的抑制作用及其分子機制。
　　結(jié)果：雌二醇可以促進MCF-7細胞增殖，MCF-7細胞增殖率和細胞數(shù)量隨著雌馬酚濃度的升高和作用時間增加而下降。雌馬酚對MCF-10A細胞無明顯影響。與對照組相比，雌馬酚組MCF-7細胞凋亡率明顯增加，并將細胞周期阻滯于G0G1期。細胞遷移能

3、力隨雌馬酚濃度升高而降低。雌二醇可以上調(diào)抗凋亡蛋白bag-1、bcl-2以及細胞生長因子VEGF蛋白表達量，隨著濃度不斷升高，雌馬酚對bag-1、bcl-2、VEGF蛋白表達的抑制作用越發(fā)明顯，當(dāng)雌馬酚濃度達到10-5mol/L時，bag-1、bcl-2、VEGF蛋白的表達量與對照組相比最低。雌二醇對總ERK1/2和總p38的表達無影響，可上調(diào)p-ERK1/2和p-p38蛋白表達量;雌馬酚對總ERK1/2和總p38蛋白表達無影響;隨著雌