2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、HIF-1α是細胞應對低氧微環(huán)境時表達的一種關鍵性核轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子。HIF-1α與HIF-1β結合形成低氧誘導因子-1(HIF-1),HIF-1可對多種基因進行靶向調(diào)控,介導腫瘤的低氧生存、增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移等生物學特性[1]。HIF-1α的降解減少是影響其表達的主要原因,泛素化-蛋白酶體系統(tǒng)是HIF-1α的主要降解途徑。泛素化是泛素分子在一系列泛素酶的催化作用下與底物蛋白結合,后通過蛋白酶體途徑降解底物蛋白的過程。去泛素化是泛素化的可逆過

2、程,指泛素化的底物蛋白復合物在去泛素化酶(DUBs)的作用下解離泛素分子使得再循環(huán)利用。泛素化與去泛素化過程共同控制著細胞內(nèi)多種調(diào)節(jié)蛋白的降解與穩(wěn)定,涉及細胞的生長、凋亡、侵襲和轉(zhuǎn)移等諸多過程。UCH-L3是一種去泛素化酶,參與底物蛋白的去泛素化過程,從而對細胞的發(fā)生、發(fā)展及生長轉(zhuǎn)化發(fā)揮一定的調(diào)節(jié)作用。
  目的:探究人乳癌細胞系UCH-L3基因?qū)IF-1α表達的影響及在體外對人乳癌細胞系MCF-7生物學行為的影響及調(diào)控機制。<

3、br>  方法:采用慢病毒轉(zhuǎn)染技術將UCH-L3慢病毒表達載體轉(zhuǎn)入MCF-7乳腺癌細胞系;采用熒光定量PCR、蛋白印跡(Western blot)技術分別檢測乳腺癌細胞系MCF-7和MDA-MB-231細胞正常組以及以上兩種細胞系正常組、陰性對照組、UCH-L3慢病毒過表達組之間HIF-1α、UCH-L3的mRNA水平及蛋白表達水平變化;應用劃痕實驗、CCK-8試驗檢測轉(zhuǎn)染前后MCF-7細胞生物學行為的變化。
  結果:UCH-L

4、3和HIF-1α基因在MCF-7細胞系中的mRNA及蛋白表達量均明顯低于在MDA-MB-231細胞系中的表達,具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);與陰性對照組和正常細胞組比較,UCH-L3過表達組的UCH-L3mRNA水平和蛋白水平明顯升高(P<0.05),同時HIF-1α蛋白水平的表達顯著上調(diào),HIF-1αmRNA水平表現(xiàn)出略降低趨勢,并且UCH-L3過表達組細胞增殖和遷移能力增強(P<0.05);對UCH-L3過表達組施加蛋白酶體抑制劑

5、(MG-132)抑制蛋白降解實驗,結果顯示UCH-L3過表達組的HIF-1αmRNA水平和蛋白水平隨藥物作用時間延長表現(xiàn)出持續(xù)積累趨勢。對過UCH-L3過表達組施加蛋白合成抑制劑-放線菌酮(CHX)抑制蛋白合成實驗,結果顯示UCH-L3過表達組的HIF-1α蛋白水平隨藥物作用時間延長呈現(xiàn)降低的趨勢。
  結論:UCH-L3促進MCF-7細胞的HIF-1α表達,增強其生長和遷移能力;UCH-L3影響MCF-7細胞生物學行為可能依賴依

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