轉(zhuǎn)染ADAM17-shRNA的BMSC對MCF-7人乳腺癌細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：觀察轉(zhuǎn)染ADAM17-shRNA的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cell, BMSC）與MCF-7乳腺癌細(xì)胞混合培養(yǎng)后，對MCF-7增殖能力以及侵襲能力的影響。旨在探究新的ADAM17-shRNA給予方式，為以ADAM17為靶點的乳腺癌靶向治療提供新的方法。
　　方法：設(shè)計4個針對 ADAM17以重組慢病毒為載體的shRNA，將其分別轉(zhuǎn)染入MCF-7人乳腺癌細(xì)胞中，通過 re

2、al-time PCR檢測 mRNA，篩選出對 ADAM17表達(dá)的干擾率最佳的shRNA。體外培養(yǎng)SD大鼠的BMSC，用篩選出的shRNA轉(zhuǎn)染BMSC細(xì)胞，將轉(zhuǎn)染后的BMSC與MCF-7細(xì)胞共培養(yǎng)，用real-time PCR方法檢測共培養(yǎng)后 ADAM17mRNA的表達(dá)，用 transwell侵襲實驗檢測 MCF-7的侵襲能力，用MTT法檢測MCF-7的增殖能力。
　　結(jié)果:Realtime PCR方法篩選出的shRNA-has-

3、1658可顯著抑制 MCF-7細(xì)胞ADAM17mRNA的表達(dá)。Realtime PCR檢測共培養(yǎng)后ADAM17mRNA的表達(dá)，將對照組的ADAM17mRNA相對表達(dá)水平設(shè)為100％，轉(zhuǎn)染組的ADAM17mRNA的水平明顯低于對照組，轉(zhuǎn)染組與對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。體外侵襲實驗顯示對照組和無意義序列組 MCF-7細(xì)胞到達(dá)下室的細(xì)胞數(shù)量明顯多于轉(zhuǎn)染組，轉(zhuǎn)染組與對照組比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。MTT實驗顯示，轉(zhuǎn)染組和對照組相比，轉(zhuǎn)染組細(xì)