瓜蔞含藥血清及彎齒琵甲對(duì)Hela細(xì)胞增殖抑制作用的研究.pdf

1、癌癥是威脅人類(lèi)健康的常見(jiàn)病及多發(fā)病，然而，臨床常用的化學(xué)合成藥物給患者帶來(lái)嚴(yán)重的不良反應(yīng)和明顯的毒副作用，因此，開(kāi)發(fā)天然抗腫瘤藥物越來(lái)越受到人們重視。
　　 瓜蔞是栝樓或雙邊栝樓的成熟果實(shí)，是抗癌中藥復(fù)方中常見(jiàn)的藥物，為了明確瓜蔞水煎劑對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的影響，本實(shí)驗(yàn)利用血清藥理學(xué)方法制備高、中、低3種劑量的瓜蔞含藥血清，分別處理Hela細(xì)胞24 h和48 h，MTT 法檢測(cè)該含藥血清對(duì)Hela細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用，Wright's-

2、Giemsa 染色和AO-EB 染色法觀察凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化，利用DNA 瓊脂糖凝膠電泳從分子水平檢測(cè)其對(duì)腫瘤細(xì)胞的影響。結(jié)果表明，不同劑量的瓜蔞含藥血清均對(duì)Hela細(xì)胞的增殖有抑制作用，且呈劑量時(shí)間依賴關(guān)系，其中，高劑量組瓜蔞含藥血清對(duì)Hela細(xì)胞的抑制率最大，20％的高劑量瓜蔞含藥血清在24h、48h的抑制率能分別達(dá)到36.4％和48.2％，說(shuō)明瓜蔞具有抑制宮頸癌Hela細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。
　　 彎齒琵甲(Bl

3、aps femoralis)是擬步甲科(Tenebrionidae)琵甲族(Blaptini)琵甲屬(BlapsFabricius,1775)的一個(gè)優(yōu)勢(shì)昆蟲(chóng)，民間長(zhǎng)期用于治療肺氣腫、風(fēng)濕、腫瘤等疑難雜癥。
　　 本研究首先利用血清藥理學(xué)的方法制備彎齒琵甲含藥血清，采用上述方法研究彎齒琵甲對(duì)Hela細(xì)胞增殖的抑制作用。結(jié)果顯示彎齒琵甲含藥血清能夠抑制腫瘤細(xì)胞增殖，且呈時(shí)效、量效關(guān)系，其中，20％琵甲高濃度含藥血清在24h和48h的

4、抑制率分別能達(dá)到23.4％和37.3％。
　　 為了進(jìn)一步分析彎齒琵甲抗腫瘤作用的有效成分，本研究采用硫酸銨沉淀法得到彎齒琵甲粗蛋白提取液，進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)。倒置熒光顯微鏡下觀察凋亡細(xì)胞形態(tài)，DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)凋亡細(xì)胞DNA 斷裂情況，Annexin V-FITC/PI 雙染法定量檢測(cè)凋亡細(xì)胞以及Western-blot 法檢測(cè)Caspase-3蛋白表達(dá)的情況。結(jié)果顯示彎齒琵甲粗蛋白能夠誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，15m g ﹒mL-1的彎