水稻MAPKK基因家族表達(dá)模式分析及其功能初探.pdf

1、分類號華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文水稻MAPKK基因家族表達(dá)模式分析及其功能初探ThePrelimarystudiesonExPressionPatternsandFunetionofMAPkinasekinasegenefamilyinOlyZasativaL.研究生指導(dǎo)教師指導(dǎo)小組:王明幫:羅利軍張端品:余舜武梅悍衛(wèi)劉灶長劉鴻艷陳亮教授教授副研究員研究員研究員副研究員副研究員專業(yè):作物遺傳育種獲得學(xué)位名稱:農(nóng)學(xué)碩士研究方向:植物抗逆分子

2、生物學(xué)獲得學(xué)位時(shí)間:2008年6月日華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科學(xué)技術(shù)學(xué)院二00八年六月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2008屆碩士學(xué)位論文一a八卜曰只一從nU︶n乙O‘Q山qOQ口OJgJqLJ月任一0101勻一匕尸勻尸a以U八b︵卜U八b八b﹄b八匕﹄了︻了1.1Jesllesl，es19曰n乙Q‘Q自9白Q白O自9白9自O(shè)乙9自Q‘9自Q乙Q自9自Q自Q乙Q乙Q‘9自Q乙Q乙O乙9自............…….........……............…

3、…:，........…..........…..........…..........…..........…........……2.2.2.2第一鏈cDNA的合成.......……2.2.2.3熒光定量PCR.............……2.2.3植物表達(dá)載體的構(gòu)建............……2.2.3.1超表達(dá)載體的構(gòu)建..........……2.2.3.2抑制表達(dá)載體的構(gòu)建........……2.2.4表達(dá)載體導(dǎo)入根癌農(nóng)桿菌..

4、.......……2.2.4.1農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備....……2.2.4.2凍融法導(dǎo)入根癌農(nóng)桿菌EHA105菌株2.2.5葉盤法轉(zhuǎn)化煙草................……2.2.5.1農(nóng)桿菌的培養(yǎng)..............……2.2.5.2共培養(yǎng)....................……2.2.5.3誘導(dǎo)叢生芽................……2.2.5.4誘導(dǎo)生根..................……2.2.5.5轉(zhuǎn)基因

5、煙草的PCR檢測......……2.2.6農(nóng)桿菌介導(dǎo)的水稻轉(zhuǎn)化..........……2.2.6.1外植體的消毒及愈傷組織誘導(dǎo)……2.2.6.2愈傷組織繼代培養(yǎng)..........……2.2.6.3愈傷組織預(yù)培養(yǎng)............……2.2，6.4農(nóng)桿菌的培養(yǎng)二，.........……，.2.2.6.5農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化與共培養(yǎng).........……2.2.6.6抗性愈傷組織篩選..........……2.2.6.7愈傷組織預(yù)分化培養(yǎng)..

6、......……2.2.6.8愈傷組織分化與植株再生....……2.2.6.9誘導(dǎo)生根及移栽............……2.2.6.10轉(zhuǎn)基因材料的PCR檢測....……2.2.7農(nóng)桿菌介導(dǎo)的擬南芥轉(zhuǎn)化.........……2.2.7.1擬南芥轉(zhuǎn)化(FLoRALDIP)2.2.7.2潛在轉(zhuǎn)化株系的篩選.........……2.2.7.3轉(zhuǎn)基因材料的PCR檢測......……一.28..28..25..28..30..30..30..32

7、..32..34..36..37.39一3結(jié)果與分析...................................……3.1OSMKKS基因的序列的尋找及分析.............……3.1.1OsMKKs基因序列的尋找...............……3.1.2OsMKKs染色體定位...................……3.L3OsMKKs同源性分析..................……3.2水稻MAPKK基因家族的

8、表達(dá)模式分析......……3.2.1OsMKKs特異序列的引物設(shè)計(jì)與驗(yàn)證.....……3.2.2OsMKKs在不同器官下表達(dá)分析.........……3.2.3osMKKs在不同逆境下的表達(dá)分析.......……3.2.3.1OsMKKI表達(dá)分析.................……3.2.3.2OsMKK3表達(dá)分析..................……3.2.3.3OsMKK4表達(dá)分析.................……3.2.