康柏西普對兔穿透性角膜移植術(shù)后角膜新生血管的影響.pdf

1、目的：
　　我國現(xiàn)有角膜盲患者約300萬人，且每年以10-20萬的速度增長。角膜移植術(shù)是治療角膜盲患者的最有效方法，術(shù)后角膜新生血管生長仍是角膜移植手術(shù)失敗的主要因素。目前臨床上主要使用糖皮質(zhì)激素類藥物控制角膜移植術(shù)后角膜新生血管的生長。糖皮質(zhì)激素類藥物的治療效果確鑿，但容易引起激素性青光眼、并發(fā)性白內(nèi)障等眼部并發(fā)癥。因此尋找一種既能有效控制角膜移植術(shù)后角膜新生血管的生長又很少引起眼部并發(fā)癥的安全、高效的抗新生血管藥物顯得尤為重要

2、。
　　康柏西普是一種由我國自發(fā)研制的具有自主知識產(chǎn)權(quán)的新型抗血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）藥物，它已被廣泛使用于眼底新生血管的治療，國內(nèi)外尚無用于治療角膜移植術(shù)后新生血管的報道。本實驗通過觀察康柏西普對兔穿透性角膜移植術(shù)（penetrating keratoplasty, PKP）術(shù)后的影響進一步探索其在兔PKP術(shù)后新生血管生長方面的治療作用。
　　眾所

3、周知，在血管化組織中應(yīng)用血管生長抑制劑將影響組織創(chuàng)傷愈合過程。因此，康柏西普控制角膜新生血管生長同時是否會阻礙角膜傷口的愈合是本實驗需要關(guān)注的重要問題。角膜傷口的愈合過程中，靜態(tài)的角膜基質(zhì)細胞被激活轉(zhuǎn)化為角膜成纖維細胞，損傷修復(fù)過程中部分角膜成纖維細胞形態(tài)功能進一步改變轉(zhuǎn)化為肌成纖維細胞。肌成纖維細胞和平滑肌細胞有相同特征，具有收縮性，可以促進損傷愈合。α-平滑肌肌動蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）是肌成纖

4、維細胞的特異性細胞標(biāo)記物，它的測定能夠反應(yīng)角膜中肌成纖維細胞的水平，進而推測角膜傷口的愈合程度。
　　本實驗旨在通過測定VEGF的表達，初步探明康柏西普對兔PKP術(shù)后角膜新生血管的抑制作用；觀察α-SMA的變化推測角膜傷口修復(fù)過程以及康柏西普對傷口愈合的影響，從而指導(dǎo)人PKP術(shù)后新生血管的治療。
　　方法：
　　1分組：將48只新西蘭大白兔隨機分為4組，每組12只。分別為：對照組、實驗1組、實驗2組和實驗3組。對照組：

5、常規(guī)點眼，即兔PKP造模后妥布霉素滴眼液點術(shù)眼4/日；實驗1組：常規(guī)點眼，同時加用0.01％康柏西普點術(shù)眼4/日；實驗2組：常規(guī)點眼，同時加用0.1％康柏西普點術(shù)眼4/日；實驗3組：常規(guī)點眼，同時開始0.1％康柏西普0.1ml結(jié)膜下注射1/周。
　　2制備兔PKP模型：7.5mm環(huán)鉆制備植片；7.25mm環(huán)鉆鉆切，15°前房穿刺刀鉆痕處穿刺，角膜剪剪下角膜片制成植床；10-0尼龍線先于12:00、6:00、9:00、3:00各縫合

6、1針，再于每象限加縫2針，縫合植片。48只兔右眼均按照以上步驟制備PKP模型。
　　3實時熒光定量聚合酶鏈式反應(yīng)（Real time-polymerase chain reaction, qPCR）術(shù)后第2周、4周、6周、8周各時間點每組處死3只兔，取材后采用qPCR方法檢測各時間點角膜VEGF和α-SMA的表達情況。
　　4統(tǒng)計：應(yīng)用SPSS21.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果：
　　1 VEGF的表達：對照

7、組和各個實驗組VEGF的表達均隨時間推移而先增加后減少，且第4周時 VEGF的表達量最高；所有時間點各實驗組與對照組比較，VEGF表達均降低且有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；實驗1組和實驗2組比較，各時間點VEGF表達量均無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05），實驗3組所有時間點VEGF表達較實驗2組低，降低程度無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。
　　2α-SMA的表達：隨時間進展，所有組α-SMA表達均呈上升趨勢，所有組內(nèi)任意時間點兩兩比較均有

8、統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）；所有實驗組4個時間點α-SMA表達均低于對照組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；實驗1組和實驗2組比較，實驗2組和實驗3組比較，各時間點α-SMA表達均無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1康柏西普可以抑制兔穿透性角膜移植術(shù)后角膜新生血管的生成。
　　2康柏西普在抑制兔穿透性角膜移植術(shù)后角膜新生血管生成的同時不影響角膜傷口的愈合。
　　3不同給藥濃度對兔穿透性角膜移植術(shù)后