法舒地爾抑制心肌炎癥和凋亡改善間歇低氧誘導(dǎo)心肌重構(gòu)的研究.pdf

1、目的：慢性間歇低氧作為阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征的核心病理生理機制，在其相關(guān)的心血管疾病包括心肌重構(gòu)的發(fā)生發(fā)展過程中起關(guān)鍵作用。RhoA/Rho激酶（ROCK）信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可參與多種動物模型誘導(dǎo)的心肌重構(gòu)，但其在慢性間歇低氧所致心肌重構(gòu)的病理生理過程中是否發(fā)揮作用，尚未見相關(guān)研究。本實驗的目的是探究RhoA/ROCK信號通路是否參與慢性間歇低氧誘導(dǎo)的大鼠心肌重構(gòu)，同時用藥物法舒地爾（F），一種特異性ROCK抑制劑進行干預(yù)，從而對RhoA/

2、ROCK信號通路參與慢性間歇低氧誘導(dǎo)大鼠心肌重構(gòu)的可能機制進行初步探討。
　　方法：雄性SD大鼠（180-200g）隨機分為4組，每組8只：常氧對照組、常氧對照+F組、慢性間歇低氧組、慢性間歇低氧+F組，造模時間6周。測大鼠心臟重量與大鼠體重并計算其比值計算心肌肥大指數(shù)，蘇木精-伊紅（HE）染色法評估大鼠心肌肥大情況并計算心肌細(xì)胞平均直徑，馬森三色（Masson）染色法評估心肌細(xì)胞間質(zhì)纖維化情況，TUNEL法檢測心肌組織細(xì)胞凋亡情

3、況；透射電鏡觀察各組大鼠心肌超微結(jié)構(gòu)。實時熒光定量 PCR檢測炎癥相關(guān)基因IL-6、TNF-α、MCP-1、TGF-β1及NF-κB p65mRNA表達水平，Western Blot檢測大鼠心肌組織細(xì)胞中RhoA/ROCK信號通路相關(guān)蛋白RhoA、MYPT-1、p-MYPT-1（Thr853），凋亡相關(guān)蛋白Bax、Cleaved-caspase3及胞漿和胞核內(nèi)NF-κB p65的蛋白表達。
　　結(jié)果：與常氧對照組相比，慢性間歇低氧

4、組心肌肥大指數(shù)增加（P<0.01），心肌組織中平均心肌細(xì)胞直徑增加（P<0.01），心肌纖維化程度增加（P<0.01），心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)增加（P<0.01）；與此同時，炎癥因子IL-6、TNF-α、MCP-1、TGF-β1mRNA表達水平升高（P<0.01），RhoA/ROCK信號通路相關(guān)蛋白RhoA、MYPT-1、p-MYPT-1（Thr853），凋亡相關(guān)蛋白 Bax、Cleaved-caspase3的蛋白表達水平明顯增高（P<0.0

5、1）；NF-κB p65胞漿蛋白水平降低、胞核水平升高（P<0.01）。法舒地爾藥物干預(yù)6周后，慢性間歇低氧+F組大鼠的心肌肥大指數(shù)、心肌纖維化程度、心肌凋亡程度、RhoA/ROCK通路相關(guān)蛋白的表達水平較慢性間歇低氧組明顯下降（P<0.01），NF-κB p65胞漿蛋白水平升高，胞核水平降低（P<0.01）；心肌細(xì)胞平均直徑減?。≒<0.05），炎癥細(xì)胞因子、NF-κB p65 mRNA表達水平及凋亡相關(guān)蛋白表達水平下降（P<0.05