
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文檔簡介
1、目的:前列腺是雄性生殖系統(tǒng)重要的附屬性腺,位于膀胱與尿生殖膈之間,包繞尿道的起始部,其分泌乳白色前列腺液,是精液的重要組成部分,占射出精液量的1/10-1/3,其作用具有促進受精卵生成,激發(fā)精子活力,促進精液液化,提高精子的成活率,所以前列腺在雄性生殖功能中發(fā)揮重要作用。糖尿病是嚴重危害人類健康的慢性疾病,它的危害在于后期引起的如心血管、腎病、視網(wǎng)膜病變等一系列并發(fā)癥,糖尿病可導(dǎo)致睪丸及附睪重量下降,睪丸結(jié)構(gòu)紊亂,精液質(zhì)量降低,以及男性
2、勃起功能障礙等,而糖尿病對前列腺的影響研究較少,本實驗旨在研究糖尿病對大鼠前列腺組織的影響及其IGF-1的表達情況,目的是從分子水平層次研究糖尿病對前列腺影響的可能機制,為糖尿病造成的雄性生殖障礙提供新的治療途徑奠定理論基礎(chǔ)。
方法:成年雄性SD大鼠35只,體重200-250g,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周,隨機分為2組,糖尿病模型組20只,正常對照組15只。大鼠禁食12小時,糖尿病大鼠按照STZ65mg/kg進行單次腹腔注射,對照組腹腔注
3、射等體積的枸櫞酸緩沖液,兩組均給予普通飼料喂養(yǎng),提供充足自來水,兩組大鼠自由進食水。腹腔注射STZ72小時后測尾靜脈血葡萄糖濃度(bloodglucose,BG)以BG>16.7mmol/L為成功糖尿病模型,每4周測定兩組動物體重、尾靜脈血葡萄糖濃度、代謝籠24小時尿量。9周后,再次檢查尾靜脈血糖濃度,模型組未有血糖<16.7mmol/L者,模型全部成功。將各組大鼠稱體重,麻醉(10%水合氯醛,0.3m1/100g),仰臥位固定,切取完
4、整前列腺,剔除筋膜和脂肪,立即稱取濕重后,將標本放入固定液。應(yīng)用HE染色法,光鏡下觀察二組大鼠前列腺結(jié)構(gòu),應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測各組前列腺組織IGF-1表達情況。
統(tǒng)計學(xué)處理:使用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理實驗數(shù)據(jù),所有實驗數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標準差(x±S)表示,P<0.05認為有統(tǒng)計學(xué)意義。
結(jié)果:
1、血糖、胰島素、體重、代謝籠24小時尿量、前列腺濕重及指數(shù)的變化()病組(n=20)的血糖明顯高于正常
5、組(n=15),二組血糖的比較(29.02±2.71 vs4.73±0.62)(mmol/L),差異有顯著性(P=0.000)。
糖尿病組大鼠胰島素水平明顯降低,注射STZ9周后糖尿病組(n=20)的胰島素明顯低于正常組(n=15),二組胰島素的比較(7.0:3±0.68vs23.24±1.93)(uIU/ml),差異有顯著性(P=0.000)。
糖尿病組大鼠體重明顯減輕,注射STZ9周后,糖尿病組(n=20)與正常
6、緝(n=15)比較(249.40±11.89vs377.07±15.39)(g),差異有顯著性(P=0.000)。
9周時代謝籠24小時尿量增加,糖尿癇組(n=20)尿量與正常組(n=15)比鉸(88.30±5.23vs20.80±2.00)(ml),差異有顯著性(P=0.000)。
糖尿病組大鼠前列腺濕重降低,糖尿病組(n=20)前列腺濕重與對照組(n=15)相比(201.29±24.81 vs934.15±165
7、.35)(mg),差異有顯著(P=0.000)。
糖尿病組大鼠前列腺指數(shù)降低,糖尿病組(n=20)前列腺指數(shù)與正常組(n=15)相比(0.80±0.06 vs2.47±0.34),差異有顯著性(P=0.000)。
2、HE染包及免疫組化撿測
HE染色結(jié)果:
光鏡下可見正常大鼠前列腺上皮為單層柱狀,皺襞較多,而糖尿病組大鼠前列腺上皮細胞發(fā)生萎縮,高度減低,變的扁平,皺襞減少,導(dǎo)管變得較空虛,導(dǎo)管內(nèi)分
8、泌物減少。
免疫組化結(jié)果:
正常組前列腺上皮細胞層可見IGF-1蛋白的表達,呈棕色,糖尿病組前列腺上皮IGF-1的表達明顯減弱,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析二者有差異,(5.33±1.84vs3.00±1.92)(P=0.001)。
結(jié)論:
本實驗表明:
1、IGF-1在正常前列腺上皮呈現(xiàn)陽性表達。
2、糖尿病狀態(tài)下前列腺組織上皮IGF-1表達減少。
3、糖尿病導(dǎo)致前列腺重量減輕及重
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