亞麻酸對赤潮異彎藻和米氏凱倫藻化感效應(yīng)及細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究.pdf

1、近年來，有害赤潮在我國沿海和世界各地頻繁發(fā)生，嚴(yán)重的影響了海洋生態(tài)系統(tǒng)、海洋水產(chǎn)系統(tǒng)穩(wěn)定，甚至對海洋漁業(yè)和人類健康產(chǎn)生了巨大的威脅。有害赤潮已經(jīng)成為海洋環(huán)境污染的問題之一，并引起了全球的關(guān)注。目前，對于有害赤潮的治理方法有很多種，但是，很多治理方法對于海洋系統(tǒng)具有一定的破壞性，所以，尋找一種高效、低影響的赤潮治理方法迫在眉睫。我們研究的重點(diǎn)是，依據(jù)前人研究的相生相克原理,利用大型海藻細(xì)胞內(nèi)提取出的不飽和脂肪酸來抑制海洋赤潮微藻的生長。目

2、前，有關(guān)化感物質(zhì)的抑制機(jī)理研究主要有抗氧化系統(tǒng)、光合系統(tǒng)和胞外酶等。尤其是氧化協(xié)迫系統(tǒng)，因?yàn)檠趸{迫系統(tǒng)多于其他的影響因子關(guān)聯(lián)在一起，但是化感物質(zhì)是否直接作用于某種蛋白質(zhì)或者說是否通過直接影響電子在葉綠體、線粒體中的傳遞而引起氧化脅迫的問題還有待于進(jìn)一步的研究。另外，關(guān)于化感物質(zhì)對于赤潮微藻的抑制是否是通過細(xì)胞凋亡的途徑引起的研究鮮見報(bào)道。所以說，化感物質(zhì)—不飽和脂肪酸對于赤潮微藻的氧化脅迫和細(xì)胞凋亡研究對于化感物質(zhì)抑藻劑的開發(fā)和利用具

3、有重要的意義。
　　化感物質(zhì)亞麻酸是在前期研究中從小珊瑚藻和鼠尾藻組織中分離鑒定出來的，具有很強(qiáng)的殺藻活性，本文進(jìn)一步的探究了亞麻酸對赤潮異彎藻和米氏凱倫藻的抑制機(jī)理。通過研究亞麻酸對赤潮異彎藻和米氏凱倫藻氧化脅迫和細(xì)胞凋亡的研究來探討亞麻酸對赤潮微藻的抑制機(jī)理。
　　亞麻酸作為不飽和脂肪酸的一種，普遍存在在植物體中，是動植物生長發(fā)育必不可少的物質(zhì)之一。我們通過研究亞麻酸對有害赤潮微藻氧化脅迫及細(xì)胞凋亡機(jī)制的影響來探究亞麻酸

4、對于有害赤潮微藻的化感效應(yīng)。赤潮異彎藻、米氏凱倫藻這兩種藻是近年來有害赤潮形成的主要藻種，本文主要利用多種實(shí)驗(yàn)方法來探究不飽和脂肪酸—亞麻酸對赤潮異彎藻和米氏凱倫藻氧化脅迫和細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究，從而取得了以下實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　1.亞麻酸對赤潮異彎藻和米氏凱倫藻生長量的影響
　　亞麻酸對赤潮異彎藻和米氏凱倫藻生長量的影響呈現(xiàn)低濃度促進(jìn)，高濃度抑制的趨勢。
　　2.亞麻酸對赤潮異彎藻和米氏凱倫藻抗氧化系統(tǒng)的影響
　　亞

5、麻酸作用赤潮異彎藻和米氏凱倫藻48h后，總的來說，隨著亞麻酸濃度的增加，抗氧化酶（SOD、CAT、POD）的活性和抗氧化物質(zhì)（抗壞血酸、GSH）都出現(xiàn)了先升高后下降的趨勢。
　　3.亞麻酸對赤潮異彎藻和米氏凱倫藻活性氧的影響
　　亞麻酸作用赤潮異彎藻和米氏凱倫藻48h后，隨著亞麻酸濃度的增加，羥基自由基、過氧化氫和ROS的含量逐漸的升高，超氧陰離子自由基含量先是升高，隨后又出現(xiàn)了下降的趨勢。
　　4.亞麻酸對赤潮異彎藻

6、和米氏凱倫藻氧化傷害的影響
　　亞麻酸作用赤潮異彎藻和米氏凱倫藻48h后，隨著亞麻酸濃度的增加，丙二醛的含量出現(xiàn)先升高后下降的趨勢。通過丙二醛含量的變化來反應(yīng)膜脂過氧化的程度。
　　5.臺盼藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)
　　臺盼藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)表明，亞麻酸作用赤潮異彎藻和米氏凱倫藻48h后，隨著亞麻酸濃度的增加，藻細(xì)胞的成活率逐漸下降。
　　6.亞麻酸對赤潮異彎藻和米氏凱倫藻細(xì)胞凋亡機(jī)制的影響
　　(1)赤潮異彎藻和米氏凱倫藻的超

7、微結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)表明，亞麻酸處理赤潮異彎藻后，赤潮異彎藻的細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞膜內(nèi)陷，細(xì)胞器排列紊亂，部分質(zhì)體界線不明顯并開始溶解，液泡變大，有脂肪滴出現(xiàn)；亞麻酸處理米氏凱倫藻后，米氏凱倫藻細(xì)胞出現(xiàn)質(zhì)壁分離，細(xì)胞內(nèi)部細(xì)胞器排列紊亂，界線模糊，液泡增多，出現(xiàn)脂肪滴和黑色的蛋白顆粒。
　　(2)線粒體膜電位實(shí)驗(yàn)表明，亞麻酸處理的赤潮異彎藻和米氏凱倫藻與未處理的對照組相比線粒體膜電位降低。
　　(3) Caspase-3,9酶檢測實(shí)驗(yàn)表明，亞麻