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文檔簡介
1、目的:
1、觀察不同濃度的過氧化氫對心肌細胞H9C2中基質(zhì)金屬蛋白酶活性的影響。
2、探究過氧化氫對心肌細胞 H9C2中基質(zhì)金屬蛋白酶的激活的信號通路:JNK/EMMPRIN/MMPs。
方法:
建立心肌細胞H9C2的細胞培養(yǎng)模型,在CO2的濃度為5%且37℃恒溫的孵箱內(nèi)進行培養(yǎng)。
分組:(1)正常對照組(2)過氧化氫不同濃度和時間干預(yù)組(3)過氧化氫一定的時間濃度+JNK抑制劑干預(yù)組<
2、br> 方法:通過 Western Blot也稱為蛋白質(zhì)印跡法來測心肌細胞的蛋白量的表達(通過計算所得條帶的灰度值比較)。
結(jié)果:
H2O2干預(yù)24h,MMP-2對照組(1.0±0.04)vs200組(1.7±0.04),P<0.05,顯示MMP-2在用H2O2干預(yù)濃度200umol/L時表達增高。H2O2干預(yù)24h,MMP-9對照組(1.0±0.04)vs200組(2.14±0.02),P<0.05,顯示MMP-
3、9在用H2O2干預(yù)濃度200umol/L時表達增高。MMP-2對照組(1.0±0.04)vs JNK抑制劑組(0.7±0.02), P<0.05,顯示 MMP-2在用 JNK抑制劑干預(yù)后蛋白表達會降低。P-JNK對照組(1.0±0.04)vs JNK抑制劑組(0.6±0.02),對照組(1.0±0.04)vsH2O2干預(yù)組(1.7±0.04)(H2O2干預(yù)濃度為200 umol/L,24h),組間比較,P<0.05,顯示P-JNK在用J
4、NK抑制劑干預(yù)后蛋白表達會降低,且H2O2可以使P-JNK蛋白表達增高。MMP-9對照組(1.0±0.04)vs JNK抑制劑組(0.7±0.02),P<0.05,顯示MMP-9在用JNK抑制劑干預(yù)后蛋白表達會降低。EMMPRIN對照組(1.0±0.04)vs JNK抑制劑組(0.65±0.02),P<0.05,顯示EMMPRIN在用JNK抑制劑干預(yù)后蛋白表達會降低。
結(jié)論:
用過氧化氫的終濃度為200umol/L并
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