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1、石河子大學(xué)碩士學(xué)位論文綿羊Myostatin基因cDNA全序列的克隆及在CHO中的表達(dá)姓名:劉蓉芳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):動(dòng)物遺傳育種與繁殖指導(dǎo)教師:王金富劉明軍20070601綿羊Myostatin基因eDNA全序列的克隆及在CHO細(xì)胞中的表達(dá)eDNASequenceofMyostatinGeneofSheepCloningandExpressioninCHOStudent:RongFangLiu(MolecularInheritan
2、ceandAnimalBreeding)DissertationSupervisor:ProfJinFuWang,ResearcherMingJunLiuAbstractMyostatin(MST砷istransforminggrowthfactorbeta(TGF—p)superfamilymemberofthemaiNyinanimalmuscletissue,suchasmusclegrowthregulationplaysane
3、gativeroleWiththesamefamilyofGDF一8andIGF,theMSTNgenemutationorpartlydeletioncarlleadtothecompletelossofinhibitoryfunction,thuscausemusclecellproliferationandtheincreaseofmusclefibersMSTNgenenormallythreeexonsmadtwointron
4、s,whichCanexpressionindifferenttissues,Butabundancesareobviousdifferences,musclehi曲estexpression,andotherorganizationshaveexpressedThecedingsequenceofSheepMSTNgeneincluding1128bpencoding375aminoacids。Manystudieshaveshown
5、thattheMSTNgeneiSaffectedanimalmusclegrowthintheimportantcandidategeneAnimalbreedinghasbecomethemajorchooseoneoftheobjectivesoftraits,Screeningandidentificationoftheimpactofthegrowthraterelatedgenesorqualitytraitloci(QTL
6、)andimprovemeatqualityincreaseleanmeatrate,haveimportanttheoreticalsignificanceandvalueMSTNgeneofsheepcloningandexpressionforgenetargetingandmUScledevelopmenteontr01mechanismmadethefound撕onInthisexperimentCodetta@)andDor
7、per(子)sheepbreedinghybridmuscletotalRNAasatemplate,eDNAwassynthesizedbyreversetranscriptionAccordingtotheknownsheepMSTNeDNAsequence,designedfivespecificprimersusednestedPCR,MSTNgenewasamplifiedMSTNgenecloninginpMD20一Tvec
8、tortoformtherecombinantplasmidMSTNpMD20TTherecombinantplasmidwastransformedintoEsehefichiacoliEuropium,usingbluewhite,screenedpositiveclonesBamHIandXhoIdigestedMSTNpMD20一TandeukaryoticexpressionvectorpcDNA31,itwillfragme
9、ntwasclonedintothevectorpcDNA3IbeenMSTNpcDNA3,1TherecombinantplasmidwastransformedintoEscherichiacoliEuropium,wasselectedbycloning,PCRamplificationandsequencinganalysisMyostatingeneexpressionusingliposomemediated,TheMSTN
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