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文檔簡介
1、目的:建立大鼠機(jī)械性創(chuàng)傷模型,制備姜黃素納米乳,觀察姜黃素納米乳對機(jī)械性創(chuàng)傷造成的大鼠繼發(fā)性心功能損傷的影響,探討作用機(jī)制。
方法:1.健康成年雌雄不限SD大鼠,體重200~250g,建立大鼠機(jī)械性創(chuàng)傷模型,觀察不同創(chuàng)傷程度對心肌凋亡和心功能的影響,選定標(biāo)準(zhǔn)創(chuàng)傷程度建立動物模型。2.用乳化-蒸發(fā)法制備姜黃素納米乳,測量粒徑參數(shù),保存?zhèn)溆谩?.健康成年雌雄不限SD大鼠,體重200~250g,隨機(jī)分為四組(n=5):對照組、創(chuàng)傷組
2、、創(chuàng)傷藥物干預(yù)組和創(chuàng)傷溶劑組。建立大鼠機(jī)械性創(chuàng)傷模型,創(chuàng)傷后12h,取心臟組織做冰凍切片,用TUNEL法檢測心肌凋亡。4.健康成年雄性SD大鼠,體重200~250g,隨機(jī)分為四組(n=5):對照組、創(chuàng)傷組、創(chuàng)傷藥物干預(yù)組和創(chuàng)傷溶劑組。創(chuàng)傷后12h,經(jīng)頸總動脈插管觀察記錄左心室心功能參數(shù)(左室發(fā)展壓LVDP=左心室收縮壓LVSP-左心室舒張末期壓LVEDP,左室最大上升速率+dp/dtmax,左室最大下降速率-dp/dtmax)等指標(biāo)。5
3、.健康成年雄性SD大鼠,體重200~250g,隨機(jī)分為四組(n=5):對照組、創(chuàng)傷組、創(chuàng)傷藥物干預(yù)組和創(chuàng)傷溶劑組。創(chuàng)傷后1.5h,取不同組別大鼠外周血檢測血液中TNF-α的濃度。6.采用單核細(xì)胞系(THP-1),分為四組:對照組、LPS組、藥物干預(yù)組和溶劑組。用LPS建立應(yīng)激炎癥模型,用ELISA法檢測單核細(xì)胞釋放TNF-α的情況,用DCFH-DA法檢測單核細(xì)胞內(nèi)ROS濃度變化。7.采用大鼠胚胎心肌細(xì)胞(H9c2),分為四組:對照組、T
4、NF-α組、藥物干預(yù)組和溶劑組。用TNF-α建立心肌細(xì)胞損傷模型,用DCFH-DA法檢測單核細(xì)胞內(nèi)ROS濃度變化。
結(jié)果:1.隨著創(chuàng)傷轉(zhuǎn)數(shù)的增加,心肌細(xì)胞凋亡的程度呈正相關(guān)增加,與對照組組件差異顯著(P<0.01),創(chuàng)傷后左心室血流動力學(xué)參數(shù)(LVDP、+dp/dtmax、一dp/dtmax)較對照組顯著降低(P<0.01)。2.藥物干預(yù)后,左心室血流動力學(xué)和TUNEL凋亡結(jié)果分析顯示,創(chuàng)傷后的心肌細(xì)胞凋亡減少(P<0.01)
5、、血流動力學(xué)參數(shù)升高(P<0.01),與溶劑組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。3.創(chuàng)傷后,大鼠外周血TNF-α在1.5h時顯著升高(P<0.01),藥物干預(yù)后,TNF-α相比創(chuàng)傷組顯著降低(P<0.01),與溶劑組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。4.單核細(xì)胞LPS炎癥模型中,藥物干預(yù)組TNF-α釋放量顯著低于LPS組(P<0.01),與對照組、溶劑組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。5.單核細(xì)胞LPS炎癥模型和心肌細(xì)胞TNF-α損傷
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