姜黃素對MPTP所致多巴胺能神經元損傷的保護作用及機制.pdf

1、目的：探討姜黃素對MPTP所致多巴胺能神經元損傷的保護作用及可能機制. 方法：將清潔級雄性C57BL/6J小鼠40只,16-20周齡,體重20-30克,隨機分成5組,因姜黃素溶于DMSO,所以要考慮溶劑DMSO對實驗有無影響,因此分組如下:實驗組1(Cur20+MPTP,姜黃素20 mg.kg<'-1>.d<'-1>);實驗組2(Cur50+MPTP,姜黃素50mg.kg<'-1>.d<'-1>);對照組1(NS+MPTP);對

2、照組2(DMSO+MPTP)和正常對照組(DMSO+NS).實驗組每天定點稱體重分別按姜黃素20 mg.kg<'-1>、50 mg.kg<'-1>灌胃×7天,每天一次,在第7天,姜黃素灌胃后1小時,按體重一次性腹腔注射MPTP(40mg.kg<'-1>);對照組1、2同實驗組分別予等量NS和DMSO灌胃7天,第7天灌胃后1小時,稱體重一次性腹腔注射MPTP(40 mg.kg<'-1>)造模;正常對照組予等量DMSO灌胃7天,第7天灌胃后

3、1小時腹腔注射生理鹽水. 第14天,小鼠被脫頸髓處死,分離出黑質和紋狀體.檢測指標: (1)采用高效液相色譜電化學(HPLC-ECD)法檢測小鼠紋狀體DA和其代謝產物HVA的含量. (2)采用免疫組織化學法檢測酪氨酸羥化酶(TH)陽性細胞數,以了解黑質內DA神經元的變性和壞死情況.(3)測黑質GSH,SOD活性(4)測體外姜黃素清除DPPH·自由基的能力. 結果： (1)紋狀體DA和HVA含量、黑質TH陽性神經元

4、數量以及黑質中SOD、GSH活性測定結果均顯示對照組1、2(NS+MPTP,DMSO+MPTP)與正常對照組(DMSO+NS)相比有明顯降低以及對照組1、2之間無差別(p<0.05),這些結果均證實DMSO對我們的實驗結果沒有影響以及我們制作的PD模型是成功的. (2)HPL.C結果顯示:對照組1、2(Ns+MPTP,DMSO+MPTP)小鼠紋狀體內DA和HVA含量較正常對照組顯著降低,降低約70﹪;實驗組(Cur20+MPTP

5、,Cur50+MPTP)小鼠紋狀體內DA和IHVA含量較對照組1、2明顯升高(p<0.05). (3)TH免疫組化結果顯示:與正常對照組(DOMS+NS)比較,對照組1、2(Ns+MPTP,DMSO+MPTP)小鼠中腦黑質TH陽性神經元數量明顯減少(p<0.05);實驗組1、2(Cur20+MPTP,Cur50+MPTP)小鼠中腦黑質TH陽性神經元數目明顯高于對照組1、2(p<0.05). (4)黑質GSH,SOD測定結

6、果顯示:較正常對照組,對照組1、2(Ns+MPTP,DMSO+MPTP)GSH,SOD活性明顯降低,與對照組1、2比較,實驗組(Cur20+MPTP,Cur50+MPTP)GSH、SOD活性顯著升高(p<0.05). (5)體外測姜黃素具有顯著的清除DPPH·自由基的能力. 結論： (1)MPTP制作的小鼠PD模型是成功的. (2)姜黃素對MPTP所致的小鼠多巴胺能神經元損傷具有保護作用. (3)