姜黃素對(duì)百草枯中毒腎臟炎癥損傷的干預(yù)研究.pdf

1、目的:研究急性百草枯中毒大鼠腎損傷時(shí)炎癥因子的動(dòng)態(tài)變化及姜黃素的干預(yù)作用和機(jī)制。
　　方法:1.將清潔級(jí)SD大鼠(60只)隨機(jī)的分成4組，正常對(duì)照組，姜黃素對(duì)照組，百草枯染毒組（2％質(zhì)量濃度的百草枯溶液100mg/kg灌胃染毒），姜黃素干預(yù)組（百草枯灌胃染毒后，分別在15min、24h、48h3個(gè)時(shí)間點(diǎn)，于腹腔內(nèi)注射50mg/kg姜黃素）每組各15只。在經(jīng)過(guò)以上不同處理后，第1、3、7天從各組隨機(jī)抽取5只大鼠，麻醉處死，高速離心下

2、腔靜脈血取上清，同時(shí)留取腎組織，-80℃保存。
　　2.各組大鼠經(jīng)過(guò)不同處理后觀察它們的行為學(xué)改變。
　　3.苦味酸比色法測(cè)定血清肌酐水平，脲酶法測(cè)定尿素氮水平。雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)分別測(cè)定IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α mRNA表達(dá)情況。蛋白免疫印跡法(Western blotting)檢測(cè)大鼠腎組織細(xì)胞核內(nèi)NF-κB蛋白表達(dá)量。
　　4.觀察光鏡下各組大鼠腎組織的病理變化。
　　

3、結(jié)果:1.正常對(duì)照組和姜黃素對(duì)照組各大鼠表現(xiàn)活動(dòng)靈敏，反應(yīng)自如，進(jìn)食正常，皮毛光滑。而百草枯染毒組各大鼠，在染毒30分鐘后開始，活動(dòng)表現(xiàn)增多，呈易激惹狀態(tài);6h后表現(xiàn)懶散，活動(dòng)量逐漸減少，走路晃動(dòng)，喜蜷縮，呼吸急促，不進(jìn)食，毛發(fā)戰(zhàn)栗;3天時(shí)表現(xiàn)最重;在7天時(shí)觀察到大鼠精神狀態(tài)較前有好轉(zhuǎn)，活動(dòng)量有所增加，進(jìn)食量基本恢復(fù)。姜黃素干預(yù)組以上癥狀都較百草枯染毒組為輕，7天時(shí)癥狀基本好轉(zhuǎn)，活動(dòng)飲食增加。
　　2.與正常對(duì)照組比較，姜黃素對(duì)照

4、組各項(xiàng)指標(biāo)水平無(wú)明顯變化，結(jié)果無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。百草枯染毒組，肌酐、尿素氮水平和NF-κB蛋白表達(dá)顯著升高，肌酐、尿素氮水平水平在第3天達(dá)到峰值，NF-κB蛋白表達(dá)在第1、3、7天持續(xù)升高，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05)，百草枯染毒組，IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α mRNA表達(dá)均顯著升高，IL-1β、IL-10、TNF-α mRNA表達(dá)在第3天達(dá)峰值，IL-6水平則持續(xù)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.0

5、5)。與同時(shí)間點(diǎn)百草枯染毒組相比，姜黃素干預(yù)組在第1、3、7天，肌酐、尿素氮水平和NF-κB蛋白表達(dá)量顯著下降，IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表達(dá)亦顯著降低，IL-10水平則顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05)。
　　3.光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn)，正常對(duì)照組和姜黃素對(duì)照組腎小管、腎小球結(jié)構(gòu)完整，腎小管管腔正常。百草枯染毒組大鼠腎組織在染毒后第3天，病理?yè)p害表現(xiàn)最嚴(yán)重，表現(xiàn)為腎小球球囊間隙明顯增大，細(xì)胞排列紊亂，組織出現(xiàn)明

6、顯的玻璃樣變性，并伴有管型尿，出現(xiàn)空泡樣變性，腎小管管腔上皮細(xì)胞脫落。而對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)姜黃素干預(yù)組病理?yè)p害都較同時(shí)間點(diǎn)百草枯染毒組有所減輕。
　　結(jié)論:炎癥反應(yīng)在急性PQ中毒腎損傷過(guò)程中起到了重要作用，姜黃素通過(guò)下調(diào)NF-κB的表達(dá)，降低腎組織中炎癥因子TNF-α、IL-1β、 IL-6mRNA表達(dá)水平，升高IL-10水平，而減輕PQ所致腎損傷的炎癥反應(yīng)，從而保護(hù)腎功能，降低肌酐、尿素氮水平，對(duì)急性PQ中毒所致的腎損傷有一定的保護(hù)作用