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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究急性百草枯中毒大鼠腎損傷時(shí)炎癥因子的動(dòng)態(tài)變化及姜黃素的干預(yù)作用和機(jī)制。
方法:1.將清潔級(jí)SD大鼠(60只)隨機(jī)的分成4組,正常對(duì)照組,姜黃素對(duì)照組,百草枯染毒組(2%質(zhì)量濃度的百草枯溶液100mg/kg灌胃染毒),姜黃素干預(yù)組(百草枯灌胃染毒后,分別在15min、24h、48h3個(gè)時(shí)間點(diǎn),于腹腔內(nèi)注射50mg/kg姜黃素)每組各15只。在經(jīng)過(guò)以上不同處理后,第1、3、7天從各組隨機(jī)抽取5只大鼠,麻醉處死,高速離心下
2、腔靜脈血取上清,同時(shí)留取腎組織,-80℃保存。
2.各組大鼠經(jīng)過(guò)不同處理后觀察它們的行為學(xué)改變。
3.苦味酸比色法測(cè)定血清肌酐水平,脲酶法測(cè)定尿素氮水平。雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)分別測(cè)定IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α mRNA表達(dá)情況。蛋白免疫印跡法(Western blotting)檢測(cè)大鼠腎組織細(xì)胞核內(nèi)NF-κB蛋白表達(dá)量。
4.觀察光鏡下各組大鼠腎組織的病理變化。
3、結(jié)果:1.正常對(duì)照組和姜黃素對(duì)照組各大鼠表現(xiàn)活動(dòng)靈敏,反應(yīng)自如,進(jìn)食正常,皮毛光滑。而百草枯染毒組各大鼠,在染毒30分鐘后開始,活動(dòng)表現(xiàn)增多,呈易激惹狀態(tài);6h后表現(xiàn)懶散,活動(dòng)量逐漸減少,走路晃動(dòng),喜蜷縮,呼吸急促,不進(jìn)食,毛發(fā)戰(zhàn)栗;3天時(shí)表現(xiàn)最重;在7天時(shí)觀察到大鼠精神狀態(tài)較前有好轉(zhuǎn),活動(dòng)量有所增加,進(jìn)食量基本恢復(fù)。姜黃素干預(yù)組以上癥狀都較百草枯染毒組為輕,7天時(shí)癥狀基本好轉(zhuǎn),活動(dòng)飲食增加。
2.與正常對(duì)照組比較,姜黃素對(duì)照
4、組各項(xiàng)指標(biāo)水平無(wú)明顯變化,結(jié)果無(wú)顯著性差異(P>0.05)。百草枯染毒組,肌酐、尿素氮水平和NF-κB蛋白表達(dá)顯著升高,肌酐、尿素氮水平水平在第3天達(dá)到峰值,NF-κB蛋白表達(dá)在第1、3、7天持續(xù)升高,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),百草枯染毒組,IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α mRNA表達(dá)均顯著升高,IL-1β、IL-10、TNF-α mRNA表達(dá)在第3天達(dá)峰值,IL-6水平則持續(xù)升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0
5、5)。與同時(shí)間點(diǎn)百草枯染毒組相比,姜黃素干預(yù)組在第1、3、7天,肌酐、尿素氮水平和NF-κB蛋白表達(dá)量顯著下降,IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表達(dá)亦顯著降低,IL-10水平則顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3.光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn),正常對(duì)照組和姜黃素對(duì)照組腎小管、腎小球結(jié)構(gòu)完整,腎小管管腔正常。百草枯染毒組大鼠腎組織在染毒后第3天,病理?yè)p害表現(xiàn)最嚴(yán)重,表現(xiàn)為腎小球球囊間隙明顯增大,細(xì)胞排列紊亂,組織出現(xiàn)明
6、顯的玻璃樣變性,并伴有管型尿,出現(xiàn)空泡樣變性,腎小管管腔上皮細(xì)胞脫落。而對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)姜黃素干預(yù)組病理?yè)p害都較同時(shí)間點(diǎn)百草枯染毒組有所減輕。
結(jié)論:炎癥反應(yīng)在急性PQ中毒腎損傷過(guò)程中起到了重要作用,姜黃素通過(guò)下調(diào)NF-κB的表達(dá),降低腎組織中炎癥因子TNF-α、IL-1β、 IL-6mRNA表達(dá)水平,升高IL-10水平,而減輕PQ所致腎損傷的炎癥反應(yīng),從而保護(hù)腎功能,降低肌酐、尿素氮水平,對(duì)急性PQ中毒所致的腎損傷有一定的保護(hù)作用
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