姜黃素對急性百草枯中毒大鼠肝損傷的干預研究.pdf

1、目的:
　　研究急性百草枯大中毒鼠肝損傷氧化應激和炎癥指標的動態(tài)變化及姜黃素的干預效果和機制。
　　方法:
　　1.60只清潔級SD大鼠隨機分為4組，正常對照組（15只），姜黃素對照組（15只），百草枯染毒組（15只，質(zhì)量濃度為2％的百草枯溶液100mg/kg灌胃染毒），姜黃素干預組（15只，在百草枯灌胃染毒后，分別于15min、24h、48h3個時間點，腹腔注射姜黃素50mg/kg）。不同處理后，在第1、3、7天麻醉

2、處死大鼠，下腔靜脈取血，高速離心后取上清，并留取肝組織，-80℃保存。
　　2.觀察各組大鼠經(jīng)不同處理后行為學的改變，如活動，呼吸，皮毛及精神狀態(tài)方面的改變，光鏡下觀察各組大鼠肝組織的病理變化情況。
　　3.化學比色法檢測血清ALT、AST、TBIL水平變化及肝組織勻漿SOD、CAT活力，MDA含量的變化，RT-PCR法檢測轉(zhuǎn)錄因子Nrf2、TNF-α、IL-1β mRNA表達情況，Western blot檢測Nrf2、NF

3、-κB蛋白表達情況，雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測HO-1、NQO-1、TNF-α、IL-1β、水平變化。
　　結(jié)果:
　　1.正常對照組和姜黃素對照組大鼠活動自如，反應靈敏，皮毛光滑。百草枯染毒組大鼠:在染毒30分鐘后，大鼠活動明顯增多，易激惹;6h后，活動減少，走路震顫，蜷縮抱團，呼吸急促，毛發(fā)戰(zhàn)栗;3天時癥狀最重，口唇發(fā)紺，口周有紅色的血性分泌物;7天時大鼠精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，活動增加。姜黃素干預組癥狀較百草枯染毒

4、組輕，7天時癥狀明顯好轉(zhuǎn)，飲食活動增加。光鏡下可見，百草枯染毒組大鼠肝組織在染毒后第3天，病理損害最嚴重，各個時間點姜黃素干預組病理損害都較同時間點百草枯染毒組有所減輕。
　　2.與正常對照組相比，姜黃素對照組各項觀察指標無顯著變化(P＞0.05);百草枯染毒組在1、3、7天，MDA水平顯著升高，SOD、CAT活力顯著降低，Nrf2 mRNA和蛋白表達顯著升高(P＜0.05)，HO-1、NQO-1活力在第1、3天明顯升高(P＜0.

5、05)，在第7天，NQO-1活力仍明顯高于正常(P＜0.05)。與同時間點百草枯染毒組比較，姜黃素干預組在第1、3、7天，MDA含量顯著降低，SOD、CAT、HO-1、NQO-1活力顯著升高，Nrf2蛋白和Nrf2mRNA表達顯著升高(P＜0.05)。
　　3.與正常對照組比較，百草枯染毒組在第1、3、7天，ALT、AST、TBIL、水平顯著升高(P＜0.05)，在各個時間點TNF-α、IL-1β mRNA表達顯著升高，TNF-α

6、、IL-1β和NF-κB蛋白表達顯著升高(P＜0.05)。與同時間點百草枯染毒組比較，姜黃素干預組在各個時間點，ALT、AST、TBIL水平顯著降低，TNF-α、IL-1β mRNA顯著降低，NF-κB蛋白表達明顯降低（P＜0.05）
　　結(jié)論:姜黃素通過誘導Nrf2的表達，升高HO-1、NQO-1、SOD、CAT活力，降低MDA含量，提高肝組織細胞的抗氧化應激能力;另一方面通過下調(diào)NF-κB的表達，降低肝組織中TNF-α、IL-