結(jié)合EGFR3’非翻譯區(qū)的蛋白質(zhì)復合物的分離與鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、近年來,mRNA3'UTR(untranslated region)或5'UTR的功能研究成為生物學研究的熱點之一。mRNA UTR往往存在一些調(diào)控元件,如頸環(huán)結(jié)構(gòu)、內(nèi)部核糖體進入位點(internalribozyme entry site,IRES)等。一些蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)復合物可能與這些調(diào)控元件結(jié)合,從而影響該mRNA的轉(zhuǎn)錄、加工、出核和亞細胞定位、翻譯以及翻譯后修飾等。表皮生長因子受體(epidermal growth factor

2、 receptor,EGFR)的胞內(nèi)特異酪氨酸殘基發(fā)生磷酸化,可招募睹如Shc、Grb2、磷脂酶Cγ和Src等信號蛋白,進而激活下游信號轉(zhuǎn)導通路;因此,細胞中EGFR就顯得尤為重要。
　　 本研究運用蛋白質(zhì)親和沉降(affinity pull down)和MALDI-TOF-TOF質(zhì)譜分析技術(shù),從宮頸癌HeLa全細胞裂解液中分離和鑒定與EGFR3'UTR相互作用的蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)復合物,通過對這些蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)復合物的研究,初步探

3、索EGFR3'UTR在mRNA轉(zhuǎn)運、mRNA穩(wěn)定、亞細胞定位或翻譯等方面潛在的調(diào)控作用。MALDI-TOF-TOF質(zhì)譜肽質(zhì)量指紋圖譜分析鑒定出七種與EGFR3'UTR可能存在相瓦作用的蛋白質(zhì),分別為白細胞介素增強結(jié)合因子3(Interleukin enhancer-binding factor3,ILF3),透明質(zhì)酸介導的遷移受體(Hyaluronan mediated motility receptor,RHAMM),hnRNPQ(H

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