抗CD146抗體在異基因造血干細(xì)胞移植后急性移植物抗宿主病中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討抗CD146抗體AA98在異基因造血干細(xì)胞移植后急性移植物抗宿主?。╝cutegraft versus host disease，aGVHD）進(jìn)程中的作用。
　　方法：將純化的AA98抗體以及對照抗體AA1采用清除內(nèi)毒素的柱子進(jìn)行內(nèi)毒素清除，檢測清除前后內(nèi)毒素水平，并對成功清除內(nèi)毒素的抗體測定濃度。BALB/c(H2Kd)受體小鼠接受1050cGy全身性致死性輻照，通過尾靜脈注射的方法輸注1×107C57BL/6(H2K

2、b)小鼠來源的骨髓細(xì)胞和5×106全脾細(xì)胞，建立aGVHD模型。于異基因造血干細(xì)胞移植后第5天，流式檢測小鼠臟器中CD146的表達(dá)。從移植第0天（day0）至移植后第6天（day6）每隔一天給小鼠腹腔注射AA98抗體（200μg/只），對照組注射相同劑量的IgG抗體或AA1抗體（抗CD146對照抗體）。觀察小鼠生存和體重變化，記錄aGVHD積分。移植后第7天采用流式細(xì)胞術(shù)檢測受體小鼠的脾臟、肝臟、肺和小腸四個(gè)臟器中的免疫細(xì)胞的表型。

3、r>　　結(jié)果：有效清除了AA1和AA98抗體中的內(nèi)毒素，使內(nèi)毒素水平降到了10EU/ml以內(nèi)，得到可用于注射aGVHD小鼠的抗體。aGVHD小鼠臟器中CD146的表達(dá)顯著高于骨髓移植對照組。aGVHD生存實(shí)驗(yàn)表明，AA98能顯著抑制異基因造血干細(xì)胞移植后aGVHD的發(fā)展，延長aGVHD小鼠的生存但不能阻止aGVHD的發(fā)生：AA98顯著延長aGVHD小鼠存活時(shí)間；顯著減輕aGVHD小鼠的體重下降；減輕小鼠 aGVHD臨床癥狀，降低臨床積分