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文檔簡介
1、目的:胚胎著床的成功是囊胚和子宮內(nèi)膜之間相互作用的結(jié)果。PDCD4作為最新被發(fā)現(xiàn)的抑癌基因之一,參與了多項細胞生理過程,包括細胞的凋亡、分化、DNA損傷、粘附等。課題組前期定量蛋白質(zhì)組技術(shù)檢測的結(jié)果顯示其在第五天小鼠子宮內(nèi)膜著床點和著床旁的表達有差異,但是其在胚胎植入過程中的作用卻未見報道。因此我們對 PDCD4在小鼠子宮內(nèi)膜中的表達模式及其作用進行了研究,以期初步闡明其對胚胎植入的影響。
方法:⑴采用熒光定量PCR、免疫蛋白
2、印跡、免疫組化以及原位雜交研究PDCD4的mRNA以及蛋白在正常妊娠小鼠和假孕小鼠早孕期子宮內(nèi)膜中的表達規(guī)律。⑵通過體內(nèi)體外人工誘導蛻膜化,研究PDCD4對小鼠基質(zhì)細胞蛻膜化的影響。⑶利用免疫蛋白印跡和免疫組化技術(shù)對女性不同月經(jīng)周期子宮內(nèi)膜以及自然流產(chǎn)子宮內(nèi)膜中的PDCD4的蛋白表達進行了檢測。
結(jié)果:①在正常妊娠小鼠早孕期子宮內(nèi)膜中,PDCD4在D4和D5表達顯著高于D1,并且在D6和D7逐漸降低。此外,PDCD4在D6和D
3、7著床旁的表達明顯高于著床點。②在假孕早期小鼠子宮內(nèi)膜中,PDCD4的表達沒有顯著差異,但是與正常妊娠小鼠早孕期對比后發(fā)現(xiàn),PDCD4的表達受到胚泡信號誘導。③下調(diào)PDCD4對小鼠基質(zhì)細胞的增殖、分化沒有影響,但有利于蛻膜化。④在女性子宮內(nèi)膜分泌期、增生期及蛻膜中PDCD4表達均不相同,分泌期>蛻膜>增生期。對比自然流產(chǎn)女性子宮內(nèi)膜和正常蛻膜發(fā)現(xiàn),PDCD4在自然流產(chǎn)子宮內(nèi)膜中的蛋白表達明顯高于正常女性蛻膜組織。
結(jié)論:PDC
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