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文檔簡介
1、目的:胚泡著床始于游離胚泡與子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的識別、定位和粘附,進(jìn)而穿透子宮內(nèi)膜表面,植入子宮內(nèi)膜基質(zhì)中。成功的植入取決于胚泡的侵入性(invasion)和子宮內(nèi)膜接受性(receptivity)的同步協(xié)調(diào)。近年來研究表明LeY(lewisY),LeX(lewisX)和sLeX(sialyllewisX)等巖藻化寡糖的階段特異性表達(dá)在胚胎發(fā)育和著床過程起十分重要的作用,而巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶(fucosyltransferases,F(xiàn)UTs)
2、,是一類參與巖藻化寡糖合成的關(guān)鍵酶。因此,對巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶表達(dá)的分析和研究不僅有助于探討寡糖在著床過程中的作用機(jī)制,并可能為著床過程進(jìn)行干預(yù)提供新的靶點(diǎn)。 Kimber研究表明子宮內(nèi)膜表面特異地表達(dá)sLeX寡糖抗原,而sLeX[NeuAca2-3Galbl-4(Fucal-3)GlcNAc-R]合成的關(guān)鍵酶是FUT7。本室前期研究工作發(fā)現(xiàn),F(xiàn)UT7在孕小鼠子宮內(nèi)膜表達(dá)并于第三天(D3)達(dá)到高峰,孕第4天(D4)維持高表達(dá),著床后
3、降低。本實(shí)驗(yàn)擬通過建立體外培養(yǎng)小鼠子宮內(nèi)膜細(xì)胞模型,在模型中分別加入兩種不同的影響因素,即雌激素和FUT7反義寡核苷酸,觀察它們對FUT7表達(dá),探討FUT7表達(dá)調(diào)控胚胎著床的分子機(jī)制。 方法:培養(yǎng)孕D4天小鼠子宮內(nèi)膜細(xì)胞,并接種于24孔板中。通過以下兩種不同方法進(jìn)行干預(yù):(1)分別用含10-8、10-7、10-6mol/L雌激素的培養(yǎng)液處理已貼壁的孕D4天小鼠子宮內(nèi)膜細(xì)胞。(2)采用兩種濃度的反義寡核苷酸封閉子宮內(nèi)膜FUT7的表
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